Estudio de los mecanismos patogénicos relacionados con la trombopoyesis en la trombocitopenia autoinmune

Grodzielski, Matías

Registro:

Documento:	Tesis Doctoral
Disciplina:	quimica
Título:	Estudio de los mecanismos patogénicos relacionados con la trombopoyesis en la trombocitopenia autoinmune
Título alternativo:	Pathogenic mechanisms related to thrombopoiesis in autoimmune thrombocytopenia
Autor:	Grodzielski, Matías
Editor:	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Filiación:	Instituto de Investigaciones Médicas ¨Alfredo Lanari¨ (IDIM). Laboratorio de Hematología Investigación
Publicación en la Web:	2017-06-09
Fecha de defensa:	2017-03-23
Fecha en portada:	2017
Grado Obtenido:	Doctorado
Título Obtenido:	Doctor de la Universidad de Buenos Aires en el área de Química Biológica
Director:	Marta, Rosana F.
Consejero:	Varone, Cecilia L.
Jurado:	Gamberale, Romina; Nesse, Alcira B.; Isturiz, Martín A.
Idioma:	Español
Palabras clave:	TROMBOCITOPENIA INMUNE; TROMBOPOYESIS; MEGACARIOCITOS; PROPLAQUETAS; AUTOANTICUERPOSIMMUNE THROMBOCYTOPENIA; THROMBOPOIESIS; MEGAKARYOCYTES; PROPLATELETS; AUTOANTIBODIES
Tema:	química/química biológica
Formato:	PDF
Handle:	http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n6159_Grodzielski
PDF:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n6159_Grodzielski.pdf
Registro:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n6159_Grodzielski
Ubicación:	Dep.QUI 006159
Derechos de Acceso:	Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Grodzielski, Matías. (2017). Estudio de los mecanismos patogénicos relacionados con la trombopoyesis en la trombocitopenia autoinmune. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n6159_Grodzielski

Resumen:

La presente Tesis de Doctorado propuso investigar la existencia de alteracionesen el proceso de trombopoyesis en la trombocitopenia inmune (PTI). Para ello seutilizó un modelo in vitro de diferenciación de megacariocitos a partir de progenitoreshematopoyéticos CD34+ normales. Al día 13 de cultivo, los megacariocitos madurosse incubaron con muestras de plasma de pacientes con PTI evaluando su efecto sobrela formación de proplaquetas, la capacidad de adhesión y spreading, la apoptosiscelular y la activación de señales intracelulares al contacto con proteínas de matriz demédula ósea. Los plasmas de PTI produjeron una inhibición dosis-dependiente de latrombpoyesis, lo que se acompañó de alteraciones morfológicas en las proplaquetas. Además, estos plasmas no afectaron la madurez ni la sobrevida de los megacariocitos,lo que sugiere que las alteraciones en la producción plaquetaria son ocasionadas porun efecto directo sobre el proceso de trombopoyesis. La fracción de inmunoglobulinas G purificadas de los pacientes reprodujo la inhibición, mientras que la eliminación delos autoanticuerpos del plasma la revirtió, demostrando que son los autoanticuerposlos responsables, al menos en parte, de estas alteraciones. Además de latrombopoyesis, los plasmas con autoanticuerpos dirigidos contra las glicoproteínas IIb- IIIa y Ia-IIa afectaron la capacidad de adhesión y spreading de los megacariocitos a losligandos medulares de estos receptores, fibrinógeno y colágeno I, respectivamente. Enparticular, la presencia de anticuerpos anti-GPIa-IIa de PTI provocó una pérdida de lacapacidad fisiológica del colágeno I de inhibir la trombopoyesis, lo que sugiere quepodría ocurrir liberación de plaquetas en forma prematura en el contexto del nichoosteoblástico medular. La existencia de alteraciones trombopoyéticas en presencia deplasmas de PTI sin autoanticuerpos detectados sugiere la existencia deautoanticuerpos dirigidos contra blancos alternativos. La presente Tesis de Doctorado expone resultados novedosos que demuestranque los autoanticuerpos de PTI tienen un efecto nocivo sobre la trombopoyesis y sobreotras funciones megacariocíticas, revelando nuevos mecanismos que contribuyen a ladisminución del recuento de plaquetas en esta entidad.

Abstract:

This PhD thesis was aimed at investigate possible alterations in the thrombopoieticprocess in immune thrombocytopenia (ITP). To this end, an in vitro model ofmegakaryocyte differentiation from normal CD34+ hematopoietic progenitors wasused. At day 13 of culture, mature megakaryocytes were incubated with plasmasamples from patients with ITP and the effect on proplatelet formation was evaluated. Besides, we studied the ability of megakaryocytes to adhere and spread on differentmatrices, cellular apoptosis and the activation of intracellular signalling after contactwith bone marrow matrix proteins. ITP plasmas induced a dose-dependent inhibition on thrombopoiesis, that wasaccompanied by morphological alterations in proplatelet architecture. In addition, thesesamples did not affect either maturity or survival of megakaryocytes, suggesting thatalterations in platelet production are due to a direct effect on the thrombopoieticprocess. The purified fraction of immunoglobulins G from ITP patients reproduced theinhibition, while elimination of autoantibodies from plasma reverted it, demonstratingthat autoantibodies are responsible, at least in part, for these alterations. In addition tothrombopoiesis, plasmas containing autoantibodies directed against glycoproteins IIb- IIIa and Ia-IIa affected megakaryocyte adhesion and spreading to the correspondingligands, fibrinogen and collagen I, in bone marrow. In particular, the presence of anti- GPIa-IIa autoantibodies caused a loss of the physiological ability of collagen I to inhibitthrombopoiesis, suggesting that premature platelet release could occur in the contextof the bone marrow osteoblastic niche. The finding of abnormalities on thrombopoiesisin the presence of ITP plasmas with no detectable autoantibodies suggests thepresence of alternative targets of autoimmunity in these samples. This PhD thesis presents new results demonstrating that ITP autoantibodies havea deleterious effect on thrombopoiesis and other megakaryocytic functions, revealingnew mechanisms that contribute to the decrease of the platelet count in this entity.

Citación:

---------- APA ----------

Grodzielski, Matías. (2017). Estudio de los mecanismos patogénicos relacionados con la trombopoyesis en la trombocitopenia autoinmune. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n6159_Grodzielski

---------- CHICAGO ----------

Grodzielski, Matías. "Estudio de los mecanismos patogénicos relacionados con la trombopoyesis en la trombocitopenia autoinmune". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2017.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n6159_Grodzielski

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