Relación entre estructura, afinidad y estabilidad en un sistema de maduración de la afinidad de anticuerpos anti-lisozima

Acierno, Juan Pablo

Registro:

Documento:	Tesis Doctoral
Disciplina:	quimica
Título:	Relación entre estructura, afinidad y estabilidad en un sistema de maduración de la afinidad de anticuerpos anti-lisozima
Título alternativo:	Relationship between structure, affinity and stability in the affinity maturation process of anti-lysozyme antibodies
Autor:	Acierno, Juan Pablo
Editor:	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Lugar de trabajo:	Fundación Instituto Leloir - CONICET. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires (IIBBA)
Publicación en la Web:	2024-06-26
Fecha de defensa:	2008
Fecha en portada:	2008
Grado Obtenido:	Doctorado
Título Obtenido:	Doctor de la Universidad de Buenos Aires en el área de Química Biológica
Departamento Docente:	Departamento de Química Biológica
Director:	Cauerhff, Ana
Consejero:	Algranati, Israel David
Idioma:	Español
Palabras clave:	ESTABILIDAD DE ANTICUERPOS; ESTRUCTURA DE ANTICUERPOS; MADURACION DE LA AFINIDAD; INTERFAZ VL-VHI; ANTICUERPOS ANTI-PROTEINAANTIBODY STABILITY; ANTIBODY STRUCTURE; AFFINITY MATURATION; VH-VL INTERFACE
Formato:	PDF
Handle:	http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4335_Acierno
PDF:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n4335_Acierno.pdf
Registro:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n4335_Acierno
Ubicación:	QUI 004335
Derechos de Acceso:	Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Acierno, Juan Pablo. (2008). Relación entre estructura, afinidad y estabilidad en un sistema de maduración de la afinidad de anticuerpos anti-lisozima. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4335_Acierno

Resumen:

La maduración de la afinidad es un mecanismo del sistema inmune de organismos superiores que modifica a un anticuerpo determinado con el fin de mejorar su afinidad por un antígeno determinado y así reconocerlo con mayor eficacia. Las consecuencias de la maduración de la afinidad fueron estudiadas en un sistema compuesto de dos anticuerpos monoclonales relacionados anti-lisozima, D44.1 y F10.6.6. Las mutaciones somáticas acumuladas en la región variable de F10.6.6 respecto de D44.1 produjeron cambios estructurales en el primero que incrementaron su afinidad hacia el antígeno en 700 veces. Mediante comparaciones de estructuras cristalinas, estudios cinéticos y termodinámicos de formación del complejo anticuerpo-lisozima, utilizando diversos fragmentos de anticuerpos generados en el laboratorio, se pudo determinar que la maduración de la afinidad de este sistema particular afecta la topología del sitio de combinación y la interacción en la interfaz VL-VH, la cual estabiliza al dominio variable de F10.6.6. Fue posible además identificar mediante el estudio de fragmentos de anticuerpo mutados aquellos residuos involucrados en la estabilización del dominio variable. Finalmente se postuló un mecanismo de maduración de la afinidad para el sistema D44.1-F10.6.6, donde las mutaciones introducidas actúan de modo conjunto para aumentar la afinidad y la estabilidad de F10.6.6.

Abstract:

Affinity maturation of anti-protein antibodies is a complex mechanism of the immune system, which inserts random point mutations to a given antibody, improving its affinity towards the antigen. The affinity maturation effects were studied in a system composed of two closely related monoclonal antibodies, D44.1 and F10.6.6. Somatic mutations accumulated in the variable region of F10.6.6 modified its structure, increasing the affinity towards the antigen by 700 times related to D44.1. It was possible to observe by means of structure comparison, kinetic and thermodynamic studies of several antibody fragments, that the affinity maturation affects the topology of the combining site and improves the interacting surfaces, stabilizing the variable domain of F10.6.6. Also, the residues involved in structure stabilization were identified. Finally, an affinity maturation mechanism for this particular system was stated, in which all the mutations act as a whole, increasing both affinity and stability.

Citación:

---------- APA ----------

Acierno, Juan Pablo. (2008). Relación entre estructura, afinidad y estabilidad en un sistema de maduración de la afinidad de anticuerpos anti-lisozima. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4335_Acierno

---------- CHICAGO ----------

Acierno, Juan Pablo. "Relación entre estructura, afinidad y estabilidad en un sistema de maduración de la afinidad de anticuerpos anti-lisozima". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2008.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4335_Acierno

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