Registro:
Documento: | Tesis de Maestría |
Disciplina: | biologia |
Título: | Expresión de HLA-DR en la superficie de monocitos circulantes de pcientes con sepsis severa : comparación con la expresión intracitoplasmática de HLA-DR, la expresión en superficie de CD40 y el test de tolerancia a LPS "ex vivo" en monocitos cultivados |
Autor: | Maskin, Bernardo C. |
Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
Publicación en la Web: | 2023-05-09 |
Fecha de defensa: | 2004 |
Grado Obtenido: | Maestría |
Título Obtenido: | Magíster de la Universidad de Buenos Aires en el área de Biología Molecular Médica |
Departamento Docente: | Departamento de Fisiología, Biología Molecular y Celular |
Director: | Wainstok, Rosa |
Idioma: | Español |
Palabras clave: | SEPSIS |
Formato: | PDF |
Handle: |
http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4197_Maskin |
PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n4197_Maskin.pdf |
Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n4197_Maskin |
Ubicación: | BMM 004197 |
Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Maskin, Bernardo C.. (2004). Expresión de HLA-DR en la superficie de monocitos circulantes de pcientes con sepsis severa : comparación con la expresión intracitoplasmática de HLA-DR, la expresión en superficie de CD40 y el test de tolerancia a LPS "ex vivo" en monocitos cultivados. (Tesis de Maestría. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4197_Maskin |
Resumen:
Definimos a la sepsis como la respuesta inadecuada del huésped frente a la infección. Es un proceso en el que coinciden mecanismos pro y antinflamatorios. La evaluación de estos fenómenos es fundamental, sobre todo ante la eventualidad de preponderancia de eventos antinflamatorios con efecto inmunosupresor. Se han desarrollado, en este contexto, diferentes técnicas que permiten evaluar la situación inmunológica de los pacientes sépticos. Se efectuó este estudio con el fin de cuantificar la depresión de diferentes mecanismos de inmunidad innata en los pacientes portadores de sepsis severa y/o shock séptico, por medio de la determinación de la expresión en superficie e intracitoplasmática de HLA-DR, la expresión en superficie de CD40, la tolerancia a endotoxina y las determinaciones plasmáticas de cortisol y proteína C reactiva en monocitos de sangre periférica Se incorporaron 12 pacientes (ll con shock séptico y uno con sepsis severa sin shock). y 9 controles sanos. Pacientes: edad promedio: 54.5 i 19.1 años, Escore APACHE II al ingreso: 23.5 (18.0-282), Escore SOFA al ingreso: 9 (8-11). Mortalidad global: 50 %. Se encontró una significativa disminución de la expresión en superficie de HLA-DR en los pacientes con sepsis severa y/o shock séptico (al ingreso al estudio) en relación con los controles: 3842 (1994242052) vs. 25368 (l9962.7-28329.5) moléculas/monocito, p<0.0001. En los pacientes en que se pudo controlar la expresión de HLA-DR al octavo día se observó un incremento significativo en los sobrevivientes y falta de incremento en los fallecidos. La expresión de HLA-DR en la superficie de los monocitos en los controles fue significativamente superior que la concentración intracitoplasmática, p = 0.0078. La expresión de HLA-DR en la membrana de los monocitos en los pacientes sépticos fue significativamente menor que la concentración intracitoplasmática, p = 0.0327. Se efectúo la comparación de los cocientes entre las concentraciones intracitoplasmáticas y en superficie (I/S) de HLA-DR en monocitos de controles y de pacientes sépticos. El cociente fue significativamente mayor en los pacientes sépticos, p = 0.0012. En conjunto estos datos parecen indicar un fenómeno dual en la disminución de la expresión de HLA-DR: disminución de la síntesis y de la expresión en superficie. La tolerancia a endotoxina se analizó después de la estimulación durante 4 horas con LPS de E Colí. (se expresó como porcentaje de células que expresan TNF-a). Se encontró una significativa disminución de la producción de TNF-a en los pacientes sépticos: 30 % (24-36) en relación con los controles sanos: 94.5 % (875-975), p= 0.0026 No se encontró expresión de CD4O en la superficie de monocitos de sangre periférica en los controles y sólo registramos expresión en 3/12 pacientes, lo que hace imposible extraer conclusiones. Se encontró un significativo incremento de los niveles plasmáticos de cortisol en los pacientes sépticos: 51 (34-60) ug/mL en relación con los controles: 11.5 (lO-13.7) ug/mL, p = 0.0016, y una correlación negativa entre 1a expresión de HLA-DR y los niveles plasmáticos de cortisol. Spearman’s m0,7676, p = 0.0002. Se utilizó la proteína C reactiva (PCR) como marcador de inflamación sistémica. Se encontraron niveles significativamente superiores en los pacientes sépticos: 21.1 (13627.9) mg/L vs. controles: 1.52 (1-2) mg/L, p<0.001 Estos resultados demuestran la existencia de actividad anti-inflamatoria precoz en los pacientes sépticos y la posibilidad de cuantificar su magnitud. Parece fundamental utilizar estas técnicas de inmunomonitoreo antes de decidir la utilización de terapéuticas antinfiamatorias, que pueden ser deletéreas, o por lo menos no efectivas. dado que el paciente puede presentar alteración funcional de sus monocitos e inmunodepresión.
Abstract:
Sepsis is caused by an inadequate response of the body to infection. It is a process with both, a pro and an anti-inflammatory mechanism. The assessment of these is crucial, because the anti-inflammatory events with immunosuppressive effects can be more important. In this context, different techniques have been developed to evaluate the immunological condition of septic patients. This study was developed to quantify the depression of different mechanisms of innate immunity in severe sepsis and septic shock patients. We used the measure in blood monocytes of the membrane expression of human leukocyte antigen-DR (HLADR), the intracytoplasmatic concentration of HLA-DR, the membrane CD4O expression, endotoxin tolerance and the plasmatic measure of cortisol and C reactive protein (CRP). Twelve patients were enrolled in the study: 11 septic shock patients and 1 with severe sepsis without shock. They were compared with 9 healthy controls. Average age: 54.5 ± 19.1 years, APACHE II score (at entry): 23.5 (18.0-2825), SOFA score (at entry): 9 (8 11). Mortality: 50 %. We found a significant reduction in membrane HLA-DR expression in septic patients at study entry related to controls: 3842 (1994242052) vs. 25368 (19962.7 283295) molecules/monocyte, p<0.0001. At day number eight, a significant increase in the HLA-DR expression was found in survivors, but not in non-survivors. The membrane monocyte HLA-DR expression in controls was significantly higher than the intracytoplasmatic concentration, p = 0.0078. In contrast, the membrane monocyte HLA-DR expression in patients was significantly lower than the intracytoplasmatic concentration. p = 0.0327. The comparison of quotients between the intracytoplasmatic and membrane concentrations (I/S) was made in monocyte HLA-DR in controls and septic patients. The difference between both groups was significant, p = 0.0012. These data suggest that there are two mechanisms involved in the lower expression of HLADR: decrease of the transcription and of the expression in membrane.. The endotoxin tolerance was analyzed in whole blood stimulated with LPS of E. Cali during 4 hours. (Expressed as percentage of cells expressing TNF- α). The TNF- α release was significantly lower in the septic patients: 30 % (24-36) related to the healthy controls: 94.5 % (87.5-97.5), p= 0.0026. CD4O expression was not found in the healthy controls blood monocyte membrane, and was onlyfound in 3/12 patients. A significant increase in the cortisol plasma levels was found in the septic patients: 51 (34-60) ug/mL related to controls: 11.5 (lO-13.7) ug/mL, p = 0.0016, and a negative correlation was found between the expression of HLA-DR and the cortisol plasma levels: Spearman’s —0.7676. CI 95 %: - 1.000 - 0.5343, p = 0.0002. CRP was used as a marker of systemic inflammation and sepsis. Significantly higher levels were found in septic patients: 21.1 (13.6-27.9) mg/L vs. controls: 1.52 (l-2) mg/L, p<0.001 These results show the presence of early anti-inflammatory phenomena in septic patients. They can be measured before using anti-inflammatory therapies, which could be deleterious or non effective, because the patients could present a depression of the monocyte function.
Citación:
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Maskin, Bernardo C.. (2004). Expresión de HLA-DR en la superficie de monocitos circulantes de pcientes con sepsis severa : comparación con la expresión intracitoplasmática de HLA-DR, la expresión en superficie de CD40 y el test de tolerancia a LPS "ex vivo" en monocitos cultivados. (Tesis de Maestría. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4197_Maskin
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Maskin, Bernardo C.. "Expresión de HLA-DR en la superficie de monocitos circulantes de pcientes con sepsis severa : comparación con la expresión intracitoplasmática de HLA-DR, la expresión en superficie de CD40 y el test de tolerancia a LPS "ex vivo" en monocitos cultivados". Tesis de Maestría, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2004.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4197_Maskin
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