Registro:
| Documento: | Tesis Doctoral |
| Disciplina: | quimica |
| Título: | Expresión y actividad de las caspasas iniciadoras (-2, -8 y -9) y la principal caspasa efectora (-3) en la regresión del cuerpo lúteo del mono rhesus y la rata |
| Autor: | Peluffo, Marina Cinthia |
| Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
| Filiación: | Fundación del Instituto de Biología y Medicina Experimental - CONICET. Instituto de Biología y Medicina Experimental (IBYME)
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| Publicación en la Web: | 2023-05-09 |
| Fecha de defensa: | 2007 |
| Fecha en portada: | 2007 |
| Grado Obtenido: | Doctorado |
| Título Obtenido: | Doctor de la Universidad de Buenos Aires en el área de Ciencias Químicas |
| Director: | Tesone, Marta |
| Consejero: | Tesone, Marta |
| Idioma: | Español |
| Palabras clave: | OVARIO; CUERPO LUTEO; LUTEOLISIS; CASPASAS; APOPTOSIS; CICLO ESTRAL Y MENSTRUAL; PREÑEZ; PGF-2ALFAOVARY; CORPUS LUTEUM; LUTEOLYSIS; CASPASES; APOPTOSIS; ESTROUS AND MENSTRUAL CYCLE; PREGNANCY; PGF-2ALFA |
| Formato: | PDF |
| Handle: |
http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4130_Peluffo |
| PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n4130_Peluffo.pdf |
| Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n4130_Peluffo |
| Ubicación: | Dep.QUI 004130 |
| Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Peluffo, Marina Cinthia. (2007). Expresión y actividad de las caspasas iniciadoras (-2, -8 y -9) y la principal caspasa efectora (-3) en la regresión del cuerpo lúteo del mono rhesus y la rata. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4130_Peluffo |
Resumen:
El cuerpo lúteo (CL) es una glándula endocrina transciente que surge, luego de la ovulación, de la luteinización de las células de granulosa y tecales del folículo ovárico. Las células luteales son responsables de producir progesterona para permitir el comienzo y el mantenimiento del embarazo. En caso de no producirse la fecundación, el CL se degenera en un proceso denominado luteólisis, decayendo los niveles de progesterona. La formación y la regresión del CL requieren de una extensa reestructuración del tejido, cuyos mecanismos moleculares aún permanecen en gran parte desconocidos. La apoptosis o muerte celular programada ha sido relacionada con la regresión o luteólisis del CL en distintas especies. Sin embargo existen controversias acerca de la participación de este proceso en el CL. Los miembros de la familia de las caspasas son cisteín-proteasas que se encuentran involucradas tanto en los eventos tempranos como en los tardíos de la apoptosis, jugando un papel central en dicho proceso. La expresión de algunas caspasas ha sido descripta en la luteólisis, con resultados contradictorios de acuerdo a los distintos modelos estudiados. La hipótesis de esta tesis fue que cambios en la expresión y/o actividad de las caspasas están involucrados en la regresión o luteólisis del CL. Por lo antes expuesto, el objetivo de esta tesis fue evaluar los cambios de expresión y/o actividad de diferentes caspasas durante la formación y regresión del CL utilizando distintos modelos. Obteniéndose los siguientes resultados y conclusiones: Varios miembros de la familia de las caspasas (-2, -8, -9 y -3) se encuentran expresados y activos en el CL durante la fase lutea del ciclo menstrual natural del mono rhesus. Asimismo, se observó un aumento transciente en la actividad de las tres caspasas iniciadoras y la principal caspasa efectora en MLCL (donde los niveles de progesterona aún son elevados). La regulación de las caspasas en el CL de primates sería a nivel de la traducción o de la activación enzimática y no a nivel de la transcripción. En cuanto a los resultados obtenidos del modelo de remoción y reemplazo hormonal, éstos sugieren que las gonadotrofinas y esteroides locales, estarían regulando principalmente la activación de la cascada de las caspasas a nivel de las iniciadoras (-2, -8 y -9). Durante la formación y regresión del CL en el ciclo estral y la preñez en la rata, se observó una expresión y/o actividad dinámica en las caspasas iniciadoras (-2, -8 y -9) y la principal efectora (-3). La actividad de las caspasas-2, -3 y -9 aumentó en el CL del ciclo anterior en E durante la luteólisis funcional, seguido de un aumento en el número de células apoptóticas y disminución en el peso en el CL del ciclo anterior en DII. Asimismo, se observó un aumento transciente en la actividad de las tres caspasas iniciadoras y la principal caspasa efectora en el CL de preñez en los días 19 y/o 21 de gestación. Este aumento fue previo o coincidente con la disminución en los niveles luteales de progesterona. Por otro lado, se observó un aumento significativo en el número de células apoptóticas e incremento en la actividad de la 20α-HSD luego del parto. Por lo tanto, un camino apoptótico independiente de las caspasas podría estar involucrado en la regresión estructural del CL de la preñez luego del parto en la rata. El tratamiento in vivo con PGF-2α a ratas en el día 14 de preñez, disminuyó los niveles luteales de progesterona a las 24 horas post inyección y esta disminución podría ser la responsable del aumento significativo en la actividad de las cuatro caspasas evaluadas a las 36 horas post tratamiento. Mientras que, no fue capaz de producir cambios notorios en el porcentaje de células apoptóticas en el CL de la preñez a los distintos tiempos post inyección evaluados. En conclusión, la activación temprana de las caspasas en el ciclo mentrual del mono rhesus, y en el ciclo estral y la preñez de la rata, sugieren que estas proteasas están involucradas en la etapa temprana de la regresión del CL. Mientras que, la administración exógena con PGF-2α no necesariamente mimetiza la luteólisis fisiológica, ya que la caída en los niveles de progesterona precede la activación de las caspasas. Además, de acuerdo a los resultados obtenidos en los distintos modelos estudiados, el control en la expresión de las caspasas puede diferir respecto al de su actividad. Dado que la actividad de las tres caspasas iniciadoras evaluadas aumentan significativamente en el CL del ciclo menstrual del mono, de la preñez de rata y post administración de PGF-2α; ambos caminos apoptóticos (camino mitocondrial y camino de receptores de muerte) se encontrarían involucrados.
Abstract:
The corpus luteum (CL) is a transient endocrine gland that it is formed after ovulation by the luteinization of the granulosa and theca cells of the follicle. Luteal cells are responsible for secreting progesterone, which permits the initiation and maintenance of pregnancy. If pregnancy does not occur, the CL regresses by a process called luteolysis and progesterone levels decline. The formation and regression of the CL involves extensive tissue remodeling, and most of the molecular mechanism are unknown. Apoptosis, or programmed cell death, is associated with luteolysis or regression of the CL in many species. However, there is some controversy about the involvement of apoptosis during luteolysis. Members of the caspase family are cysteine proteases involved in either the early or the final apoptotic events, playing a key role in this process. Information regarding the expression of different caspases during the regression of the CL has been described, with contradictory results depending on the models studied. The hypothesis of this thesis was that changes in expression and/or activity of the caspases are involved in the regression of the CL. Therefore, the aim of this thesis was to evaluate changes in expression and/or activity of different caspases during formation and regression of the CL with different models. The following results and conclusions were obtained. Several members of the caspase (-2, -3, -8, and -9) family are expressed and active in the rhesus monkey CL throughout the luteal phase of the natural menstrual cycle. Also, a transient rise in initiator and effector caspase activity at mid-late luteal phase was observed (when the progesterone levels are still high). Regulation of the caspases in the primate CL was not at the transcriptional level, but rather at the level of translation and/or enzyme activation. Regarding hormone ablation/replacement treatment, the results suggest that gonadotropic hormones and local steroids act primarily to regulate initiator (-2, -8, and -9) caspase activity rather than the main effector caspase-3, in the primate CL. Dynamic expression of the initiator caspases (-2, -8 and -9) and the main effector caspase-3 was observed during the formation and regression of the CL in the estrous cycle and pregnancy of the rat. The activity for caspase-2,-3 and -9 increased in the old CL at estrus during the functional regression, followed by an increase in the number of apoptotic cells and a decrease in the CL weight in the old CL at diestrus II. Moreover, a transient increase in initiator and effector caspase activity in the CL on days 19 and 21 of pregnancy was observed. This increase was prior to or coincident with the decrease in luteal progesterone content. Also, the number of apoptotic cells and activity of 20α-HSD increased after parturition. Therefore, a caspase-independent apoptotic mechanism may be involved in the structural regression of the rat CL after parturition. In vivo PGF2α treatment on day 14 of pregnancy decreased luteal progesterone content by 24 hours post injection and this drop may stimulate the activation of the four caspases studied at 36 hours post PGF-2α administration. However, PGF-2α treatment failed to produce any significant change in the number of apoptotic cells in the CL of pregnancy at the selected times post injection. In conclusion, the early activation of the caspases in CL during the menstrual cycle of the rhesus monkey, and the estrous cycle and pregnancy of the rat, suggests that these proteases are involved in the early stages of the luteal regression. In addition, exogenous administration of PGF-2α to rats does not necessarily mimic physiological luteolysis since the drop of luteal progesterone content precedes caspase activation. Also, according the results from the different experimental models, the control of caspase protein may differ from the activity of these proteases. Since a significant increase of the three initiator caspases studied was found in the CL during the menstrual cycle of the rhesus monkey, in the CL of pregnancy and post PGF-2α administration in the rat, both apoptotic pathways (the extrinsic death receptor and the intrinsic mitochondrial pathways) appear involved in luteolysis.
Citación:
---------- APA ----------
Peluffo, Marina Cinthia. (2007). Expresión y actividad de las caspasas iniciadoras (-2, -8 y -9) y la principal caspasa efectora (-3) en la regresión del cuerpo lúteo del mono rhesus y la rata. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4130_Peluffo
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Peluffo, Marina Cinthia. "Expresión y actividad de las caspasas iniciadoras (-2, -8 y -9) y la principal caspasa efectora (-3) en la regresión del cuerpo lúteo del mono rhesus y la rata". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2007.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4130_Peluffo
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