Registro:
Documento: | Tesis Doctoral |
Disciplina: | quimica |
Título: | Genética molecular y bioquímica de la síntesis de exopolisacáridos bacterianos |
Título alternativo: | Molecular genetic and biochemistry of bacterial polysaccharide biosynthesis |
Autor: | Ielmini, María Verónica |
Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
Publicación en la Web: | 2023-05-09 |
Fecha de defensa: | 2006 |
Fecha en portada: | 2006 |
Grado Obtenido: | Doctorado |
Título Obtenido: | Doctor de la Universidad de Buenos Aires en el área de Ciencias Químicas |
Director: | Ielpi, Luis |
Idioma: | Español |
Formato: | PDF |
Handle: |
http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4003_Ielmini |
PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n4003_Ielmini.pdf |
Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n4003_Ielmini |
Ubicación: | Dep.QUI 004003 |
Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Ielmini, María Verónica. (2006). Genética molecular y bioquímica de la síntesis de exopolisacáridos bacterianos. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4003_Ielmini |
Resumen:
Los polisacáridos son componentes característicos de bacterias Gram positivas y negativas. El interés en estas moléculas se debe a su contribución a la virulencia en bacterias patógenas y a que proveen una alternativa a los polímeros tradicionales de uso industrial, (derivados de las plantas) y a los plásticos (derivados de los hidrocarburos). En muchos casos la biosíntesis de las subunidades que los componen se conoce en detalle, pero poco se sabe sobre los mecanismos de polimerización y exportación de estas macromoléculas. Nuestro objetivo fue el estudio de ambos procesos utilizando como modelo al polisacárido xantano, heteropolímero sintetizado por Xanthomonas campestris pv. campestris (bacteria Gram negativa fitopatógena). El análisis de la secuencia genómica de X. campestris y el estudio de mutantes deficientes en la producción del xantano, mostraron que por lo menos tres proteínas estarían involucradas, GumB, GumC y GumE. Mediante aproximaciones genéticas y bioquímicas se determinó que GumE tendría la función de polimerasa, GumB favorecería el acercamiento de las membranas celulares, mientras que GumC actuaría como co-polimerasa. El estudio estructural y bioquímico del polímero reveló que la estequiometría entre estas proteínas afecta la calidad del polímero sintetizado. El estudio de estabilidad de estas proteínas en distintos entornos genéticos, reveló que la interacción no solo se da a nivel de las proteínas de polimerización/exportación sino también con las proteínas responsables de la síntesis de la subunidad repetitiva. En la presente tesis se ha aportado evidencia experimental que confirma la existencia de un complejo proteico de membrana responsable de los procesos de polimerización/exportación del xantano y que ambos procesos se llevan a cabo en forma simultánea.
Abstract:
Polysaccharides are characteristic components of Gram positive and negative bacteria. The interest in these molecules is due to its contribution to the virulence of pathogenic bacteria and because provide an alternative to the traditional industrial use polymers (plants derivatives) and to the plastics (hydrocarbons derivatives). In many cases, it was well characterized the biosynthesis of the subunit that compose them, but little it is known about the polymerization and export mechanisms of these macromolecules. Our purpose was the study of both processes in the model polysaccharide xanthan, heteropolymer synthesized by Xanthomonas campest is pv. campestris (phytopathogen Gram negative bacteria). The analysis of the genomic sequence of X. campestris and the study of mutants lacking xanthan production, showed that at least three proteins would be involved, GumB, GumC and GumE. By means of genetic and biochemical approaches it was determined that GumE has the polymerase activity, GumB would approach of the cellular membranes, while GumC would act as copolymerase.Structural and biochemical studies of the polymer revealed that the stoichiometry among these proteins affects the quality of the polymer synthesized. Stability studies of these three proteins in different mutant backgrounds revealed that the interaction is not only at the level of polymerization/export proteins, but also with the proteins responsible for the synthesis of the subunits. In the present thesis experimental evidence has been provided that confirms the existence of a protein membrane complex responsible for the polymerization/export of xanthan and that both processes are carried out in simultaneous form.
Citación:
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Ielmini, María Verónica. (2006). Genética molecular y bioquímica de la síntesis de exopolisacáridos bacterianos. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4003_Ielmini
---------- CHICAGO ----------
Ielmini, María Verónica. "Genética molecular y bioquímica de la síntesis de exopolisacáridos bacterianos". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2006.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n4003_Ielmini
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