N-acetilglucosaminidasa y su participación durante la interacción de gametas en el hamster

Zitta, Karina S.

Registro:

Documento:	Tesis Doctoral
Disciplina:	quimica
Título:	N-acetilglucosaminidasa y su participación durante la interacción de gametas en el hamster
Título alternativo:	N-acetylglucosaminidase participation during the hamster gametes interaction
Autor:	Zitta, Karina S.
Editor:	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Filiación:	Fundación del Instituto de Biología y Medicina Experimental - CONICET. Instituto de Biología y Medicina Experimental (IBYME)
Publicación en la Web:	2023-05-09
Fecha de defensa:	2006
Fecha en portada:	2006
Grado Obtenido:	Doctorado
Título Obtenido:	Doctor en Ciencias Químicas
Director:	Miranda, Patricia V.
Idioma:	Español
Palabras clave:	ESPERMATOZOIDE; REACCION ACROSOMAL; CARBOHIDRATOS; LECTINAS; N-ACETILGLUCOSAMINA; N-ACETILGLUCOSAMINIDASA; ZONA PELUCIDA; UNION PRIMARIA; UNION ESPERMATOZOIDE-ZONA PELUCIDA; FERTILIZACIONSPERM; ACROSOME REACTION; CARBOHYDRATES; LECTIN; N-ACETYLGLUCOSAMINE; N-ACETYLGLUCOSAMINIDASE; ZONA PELLUCIDA; PRIMARY BINDING; ZONA BINDING; FERTILIZATION
Formato:	PDF
Handle:	http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3926_Zitta
PDF:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n3926_Zitta.pdf
Registro:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n3926_Zitta
Ubicación:	Dep.QUI 003926
Derechos de Acceso:	Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Zitta, Karina S.. (2006). N-acetilglucosaminidasa y su participación durante la interacción de gametas en el hamster. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3926_Zitta

Resumen:

La interacción entre gametas está mediada por los oligosacáridos de la cubierta del ovocito (la zona pelúcida, ZP) y proteínas complementarias del espermatozoide. En este trabajo se estudió la participación de los carbohidratos en las distintas etapas del proceso de interacción entre el espermatozoide de hámster y ZP. La presencia de GlcNAc fue capaz de inhibir la unión del espermatozoide a la ZP, revelando que es el azúcar más relevante en este proceso de interacción. El monosacárido también inhibió la reacción acrosomal (RA) espontánea e inducida por ZP. Usando un modelo que nos permitió tener capacitación y unión a ZP sin RA, pudimos verificar que la GlcNAc está involucrada en la unión primaria a través de sitios de unión para el azúcar en el espermatozoide. Utilizando ensayos de fertilización in vitro (FIV), analizamos la participación de GlcNAc en los diferentes pasos de la interacción espermatozoide-ovocito, pero no hallamos evidencias de su participación más allá de la unión primaria. La ZP fue reconocida como un ligando por la β-N-acetilglucosaminidasa (NAG) de espermatozoides de hámster. Esta enzima estaría distribuida en dos poblaciones: una acrosomal y otra débilmente asociada a la membrana plasmática. La actividad total de NAG disminuyó como consecuencia de la activación y liberación de un modulador luego de la capacitación y RA. Ligandos de NAG fueron capaces de inhibir la unión primaria del espermatozoide a la ZP. En ensayos de FIV, no se detectó efecto alguno cuando un inhibidor de NAG fue agregado luego de que la unión primaria tuviera lugar. Por otro lado, el agregado de NAG exógena fue capaz de inhibir la interacción entre gametas. En conclusión, los resultados presentados en este trabajo indican que una NAG de membrana del espermatozoide actuaría como proteína de unión para los residuos GlcNAc terminales de la ZP, mediando de esta manera la unión primaria entre ambas gametas.

Abstract:

Gamete interaction is mediated by the oligosaccharides of the egg extracellular coat (the zona pellucida, ZP) and complementary proteins in the spermatozoa. In this study, the participation of carbohydrates in the different steps of hamster sperm interaction with the ZP was analyzed. The presence of GlcNAc inhibited sperm binding to the ZP, revealing that it is the most relevant sugar in this interaction process. The monosaccharide also inhibited the spontaneous and ZP-induced acrosome reaction (AR). Taken advantage of a method that allowed capacitation and ZP binding without AR, the involvement of sperm GlcNAc binding sites in primary binding to the ZP was verified. Carrying out in vitro fertilization (IVF) assays, the participation of GlcNAc in the different steps involved in sperm-oocyte interaction was analyzed, but no evidences for its involvement beyond primary binding was found. Soluble ZP was recognized as a ligand by the hamster sperm β-N-acetylglucosaminidase (NAG). This enzyme seems to be distributed in two populations in sperm: one within the acrosome and another one weakly associated to the plasma membrane. Total NAG activity diminished as a consequence of the activation and release of a regulatory molecule after capacitation and AR. NAG ligands were able to inhibit sperm primary binding to ZP. During IVF assays, no effect was detected when a NAG inhibitor was added after primary binding took place. Additionally, exogenous NAG was able to inhibit gamete interaction. In conclusion, results suggest that a membrane sperm NAG would be acting as a binding protein for the ZP terminal GlcNAc residues during primary binding between gametes.

Citación:

---------- APA ----------

Zitta, Karina S.. (2006). N-acetilglucosaminidasa y su participación durante la interacción de gametas en el hamster. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3926_Zitta

---------- CHICAGO ----------

Zitta, Karina S.. "N-acetilglucosaminidasa y su participación durante la interacción de gametas en el hamster". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2006.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3926_Zitta

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