Registro:
| Documento: | Tesis Doctoral |
| Disciplina: | biologia |
| Título: | Rol de la familia de citoquinas gp130 en la regulación de la función hipofisaria |
| Autor: | Perez Castro, Carolina Inés |
| Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
| Filiación: | Departamento de Fisiología y Biología Molecular y Celular. Laboratorio de Fisiología y Biología Molecular
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| Publicación en la Web: | 2017-03-01 |
| Fecha de defensa: | 2002 |
| Fecha en portada: | 2002 |
| Grado Obtenido: | Doctorado |
| Título Obtenido: | Doctor en Ciencias Biológicas |
| Director: | Arzt, Eduardo |
| Idioma: | Español |
| Tema: | biología/endocrinología
biología/biología molecular y celular
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| Formato: | PDF |
| Handle: |
http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3436_PerezCastro |
| PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n3436_PerezCastro.pdf |
| Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n3436_PerezCastro |
| Ubicación: | Dep.BIO 003436 |
| Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Perez Castro, Carolina Inés. (2002). Rol de la familia de citoquinas gp130 en la regulación de la función hipofisaria. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3436_PerezCastro |
Resumen:
Las cítoquinas mas conocidas en la regulación de la función de células de la pituitariaanterior son LIF e IL-6. Estas cítoquinas, junto con IL-11, oncostatina M, CNTF ycardiotrofma-1, son referidas como cítoquinas gp 130, debido a que comparten elmismo transductor de señales. En la presente tesis, se estudió el papel de las cítoquinas de la familia gp130 en célulasde la pitutaria anterior. Se encontró que, tanto células TtT (foliculoestrlladas-FS) como GH3 (lactosomatotrofas) expresan el mRNA para la cadena específica α del receptor de IL-11 (IL-11-R) y de CNTF-R. Ambas cítoquinas estimulan la proliferación de células FS y células GH3. También, CNTF estimula la producción hormonal (GH y PRL) encélulas GH3 e IL-11 la secreción de VEGF en células FS. Ambos tipos celularesexpresan el mRNA para CNTF. Células normales de pituitaria anterior y adenomashumanos también expresan CNTF-R(α).IL-11 y CNTF estimulan en forma similar losniveles del mRNA GH en cultivos celulares acromegálicos en monocapa, sin modificarlos niveles de secreción hormonal. CNTF estimula la secreción de PRL en monocapa deprolactinomas. En cultivos en monocapa de células normales, IL-11 y CNTF nomodifican la secreción de GH y PRL, ni los niveles del mRNA GH. Sin embargo,cuando las células son cultivadas en forma de agregados celulares, ambas cítoquinasestimulan la secreción de dichas hormonas. Se estudió además la acción de esta familiade cítoquinas sobre los procesos tumorigénicos. En clones estables de células GH3 quesobreexpresan gp130 (gp130 sentido), y clones de expresión reducida (gp130antisentido), se examinó la secreción hormonal, la proliferación celular y la capacidadtumorigénica de los clones en ratones nude. La sobreexpresión de gp130 no modificó elcomportamiento celular. Sin embargo, los clones gp130 antisentido, que no respondenal estímulo específico de la citoquina gp130, mostraron una marcada inhibición in vitroy en el desarrollo de tumores in vivo. Mediante la técnica de Differential Display seaisló e identificó un cDNA (X2CR1) el cual se expresa diferencialmente en células quesobreexpresan gp130. Este cDNA codifica para una proteina de 195-aa; no poseemotivos funcionales conocidos y posee una localización citoplasmática/nuclear. Superfil de expresión (mRNA) correlaciona con el de gp130. Presenta una secuenciaaltamente conservada (entre rata y humano), y dos isoformas (mRNA) en los distintostejidos analizados. La sobreexpresión de X2CR1, regula negativamente tanto laexpresión basal del promotor de GH, así como la estimulación con cAMP. De estosresultados se puede concluir: - las cítoquinas gp130 y sus receptores, se expresan y son funcionales en célulasnormales como tumorales de la pituitaria anterior. IL-11 y CNTF son capaces deregular, a través del transductor común gp130, la secreción de hormonas y factoresangiogénicos, así como la proliferación celular. La estructura de la glándula es de críticaimportancia para la acción de estas cítoquinas; - la sobreexpresión de gp130 en células GH3 no modifica rotundamente elcomportamiento celular. Sin embargo, la disminución en los niveles de expresión,refleja la importancia de la acción de las cítoquinas de esta familia no sólo ensituaciones fisiológicas sino patofisiológicas como en la formación y/o elmantenimiento de adenomas hipofisarios; - células lactosomatotrofas sobreexpresoras de gp130, expresan diferencialmente X2CR1. Esta nueva proteína podría tener un papel como regulador negativo de lasacciones de gp130 así como de otras rutas de señalización intracelular (como en la de CAMP).
Abstract:
Two of the most potent cytokines regulating anterior pituitary cell function are LIF and IL-6. These and others like IL-11, oncostatín M, CNTF and cardiotropin- 1 are referredto as the gp130 cytokines, because they share the gp130 protein as an initial signaltransducer. In the present thesis of work, we studied the role of the gpl30 cytokine family inanterior pituitary cells. Receptors (mRNA α-chain specific) for IL-11 and CNTF areexpressed on both lactosomatotropic (GH3 cells) and folliculostellate-FS cells (TtTcells). Both cytokines stimulate the proliferation of FS and GH3 cells. In addition, CNTF stimulates the hormonal production (GH and PRL) by GH3 cells and IL-11stimulates the secretion of VEGF, by FS cells. Both GH3 and FS cells express the CNTF mRNA. The mRNA for the CNTF-R is expressed in all of the human adenomatypes analyzed and normal pituitary cells. CNTF and IL-11 exerted a similar stimulatoryeffect on GH mRNA expression in acromegalic monolayers cell cultures, but thesecytokines had no significant influence on GH secretion. CNTF stimulates prolactinesecretion in prolactinoma monolayers cell cultures. In monolayers cell cultures fromnormal rat anterior pituitary, IL-11 and CNTF had no significant effect on the release ofeither GH or PRL, or on the level of GH mRNA. However, when these cells werecultured in aggregate cultures, both cytokines stimulated hormonal secretion. Wegenerated GH3 gp130 stable clones (gp130 sense and gp130 antisense), in order tostudy the role of gp130 cytokine family in the tumorigenic process. We examinedhormonal secretion, cell growth and tumorigenesis properties in athymic nude mice. The overexpressed gp130 clones did not shown any changes in the cellular behavior. The gp130 antisense clones did not respond to the specific gp130. Likewise, GH3gp130 antisense cells had severely impaired the in vivo tumor development. By Differential Display technique, we isolated and identified a new cDNA (X2CR1), whichdifferentially expressed in overexpressed gp130 cells. This cDNA encodes a protein of 195-aa, which contains no well-characterized functional motifs and shows acitoplasmic/nuclear localization. Its expression profile (mRNA) is linked with the gp130expression. The rat X2CRl shares striking sequence homology with its humancounterpart, and in the human tissues that we analyzed it presents two differentisoforms. GH promoter baseline activity and also under CAMP stimulation werereduced by overexpression of X2CR1. From these results the following conclusions canbe drawn: - the gp130 cytokines and their receptors are expressed and are functional in normalanterior pituitary cells and pituitary tumor cells. CNTF and IL-11 regulate, throughgp130 transducer, the secretion of hormone, VEGF and the cell proliferation. The three-dimensionalstructure of the gland is critical for these actions; - the overexpressed gp130 protein did not produce any changes in the GH3 cellularbehavior. In contrast, the reduction gp130 level, revealed the importance of the gp130cytokines actions not only in physiological but also in patophysiological situations, likethe beginning and/or the maintenance of pituitary adenoma development; - X2CR1, a novel protein isolated from overexpressed gp130 GH3 cells, may functionas a negative regulator of the gp130 cytokines actions, and also may play a similar rolein another intracellular pathways (like cAMP signaling).
Citación:
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Perez Castro, Carolina Inés. (2002). Rol de la familia de citoquinas gp130 en la regulación de la función hipofisaria. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3436_PerezCastro
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Perez Castro, Carolina Inés. "Rol de la familia de citoquinas gp130 en la regulación de la función hipofisaria". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2002.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3436_PerezCastro
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