Registro:
| Documento: | Tesis Doctoral |
| Disciplina: | biologia |
| Título: | Autoinmunidad en la infección experimental por Trypanosoma cruzi |
| Autor: | Tekiel, Valeria |
| Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
| Filiación: | Facultad de Medicina. Departamento de Microbiología, Parasitología e Inmunología
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| Publicación en la Web: | 2017-03-01 |
| Fecha de defensa: | 2001 |
| Fecha en portada: | 2001 |
| Grado Obtenido: | Doctorado |
| Título Obtenido: | Doctor en Ciencias Biológicas |
| Director: | González Cappa, Stella M. |
| Idioma: | Español |
| Tema: | biología/inmunología
biología/parasitología
biología/biomedicina
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| Formato: | PDF |
| Handle: |
http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3392_Tekiel |
| PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n3392_Tekiel.pdf |
| Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n3392_Tekiel |
| Ubicación: | Dep.BIO 003392 |
| Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Tekiel, Valeria. (2001). Autoinmunidad en la infección experimental por Trypanosoma cruzi. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3392_Tekiel |
Resumen:
En Argentina, el 10% de la población crónicamente infectada con Trypanosoma cruzipresenta patología en sistema nervioso periférico (SNP). En la presente Tesis se estudió laparticipación de mecanismos inmunes en la inducción de patología a nivel de lo quedenominamos genéricamente SNP, representado por el arco médula espinal-nervio ciático-músculo isquiotibial. Empleamos como modelo, ratones C3H/HeN infectados con las cepas RA o CA-I de T. cruzi que evidencian signos de daño principalmente en nervio ciático ymédula espinal o en músculo esquelético, respectivamente. Además, linfocitos T (LT) deestos animales son capaces de injuriar de manera selectiva los órganos antes mencionadospor transferencia pasiva en ausencia de parásitos. Hemos definido esos tejidos como blancode daño para cada una de las cepas de T. cruzi. La respuesta inmune humoral, evaluada por IFI sobre cortes de tejido normal, no mostródiferencias cepa-dependientes; los patrones de marcación evidenciaron depósitos de IgG enintersticio de músculo y en vainas de mielina en nervio. Los sueros con reactividad positivahacia antígenos conformacionales de nervio fueron definidos como Ne+. La inyecciónepineural de sueros Ne+ altera la conducción del nervio ciático de manera cepadependiente. Así, sueros de ratones infectados con la cepa RA/Ne+ inducen aumento deltiempo de latencia y disminución en la amplitud del potencial de acción nervioso (PAN) enlos animales receptores, 4 días post- inyección (dpy). Por el contrario, sueros de animalesinfectados con la cepa CA-I no afectan ningún parámetro del PAN. La inyección de IgGpurificada de sueros RA/Ne+ también disminuye la amplitud del PAN, indicando lapresencia de un menor número de axones funcionantes. En coincidencia se observandepósitos de IgG marcando fibras axonales y/o vainas de mielina e infiltrados inflamatoriosleves en los nervios inyectados con suero RA/Ne+ pero no en los inyectados con suero CA-I/ Ne+, a los 4 dpy. No se detecta presencia de parásitos en los nervios de animalesreceptores de sueros (PCR). Las alteraciones del PAN luego de la inyección de suero RA/Ne+ son similares a las detectadas en animales crónicamente infectados y en ratonesinyectados con tripomastigotes en el epineuro l7 dpy. En conjunto, estos resultados indicanla participación directa de autoanticuerpos en las alteraciones electrofisiológicas observadasen sistema nervioso periférico en la enfermedad de Chagas. En relación con la participación de LT en esta patología, se estudió el repertorio de lascadenas variables β del receptor de células T (TCRVβ) en distintos tejidos de animalescrónicamente infectados con ambas cepas de T. cruzi. En bazo, se observa la sobreexpresióndel segmento TCRVβ l3 y sub-expresión del segmento TCRVβ l4, lo cualpodría ser marcador de infección. En SNP, se detecta un alto número de cadenas expresadasen los tejidos blanco de daño, que refleja la presencia de un importante infiltradoinflamatorio. Significativamente, se observa el uso relativo aumentado del segmento TCRVβ9 en los tejidos blanco de daño para cada cepa: nervio y médula en los animalesinfectados con RA y músculo en los infectados con CA-I. Esto demuestra la existencia deun patrón de expresión diferencial de segmentos en el sitio de lesión con respecto a laexpresión periférica. El clonado, secuenciación y análisis del polimorfismo de secuencia dela región CDR3 de los segmentos TCRVβ9 sobre-expresados demostró una alta proporciónde clones idénticos en animales infectados con RA (médula y nervio), que podría estarindicando la presencia de LT autorreactivos en el sitio de lesión. Además, la elevadaproducción de citoquinas pro-inflamatorias en los tejidos blanco de daño sugiere que larespuesta inmune local tiene un papel relevante en el proceso inflamatorio. Por otro lado, enlos órganos que no son blanco principal de daño para cada una de las cepas de T. cruzi,donde no se encontraba sobre-expresión del segmento TCRVβ9, se observó dominanciaclonal en la secuencias de la región CDR3. Este hecho, conjuntamente con la imposibilidadde reproducir daño por transferencia pasiva de células, el hallazgo de material parasitario yla baja producción de IL-6 y TNFα, sugiere que los clones mayoritarios detectados en lostejidos que no son blanco principal de daño están dirigidos hacia antígenos parasitarioscontribuyendo al control local de la infección.
Abstract:
In Argentina, l0% of the chronically Trypanosoma cruzi-infected population developsperipheral nervous sytem (PNS) pathology. Herein we studied the participation of immunemechanisms in the pathology of the PNS (spinal cord-sciatic nerve- hamstring muscleaxis). Using the C3H/HeN mouse strain and two T. cruzi subpopulations (RA and CA-I) itis possible to induce pathology mainly in skeletal muscle (CA-I) or in sciatic nerve andspinal cord (RA). T cells are able to injure the organs above mentioned in absence ofparasites in a strain-dependent way. Therefore, we have defined these organs as target ofpathology for each T. cruzi strain. The humoral immune response, evaluated by IFAT, against comformational muscle andnerve antigens was simmilar for RA and CA-I antisera; deposits of IgG were observed atthe interstitial matrix in skeletal muscle and in the myelin sheats in sciatic nerve. Sera withpositive reactivity against sciatic nerve were defined as Ne+. The epineural injection of serafrom infected mice in syngeniec recipients altered the sciatic nerve conduction. This effectwas parasite-strain dependent since just recipients of sera obtained from mice infected withthe RA strain showed electrophysiological alterations. Moreover, among the sera from RA-infectedmice, only those RA/Ne+ were able to induce prolonged latencies and diminishedamplitudes of the sciatic nerve action potential (SNAP). On the contrary, sera fron CA-I-infectedmice did not alter any SNAP parameter. The abnormalities observed in theamplitude of SNAP seemed to be mediated by IgG since purified antibodies from RA/Ne+injected epineurally provoke the same effect than the whole sera, demonstrating theexpression of a lower number of functional axons. In accordance with these results, IgGdeposits labeling the axonal course and/or mielyn sheats as well as mild inflamatoryinfiltrates were found in the nerves injected with RA/Ne+ sera but not in those injected with CA-I/Ne+ sera 4 days post-injection (dpi). No parasite DNA was detected in the nerves. SNAP alterations in serum recipients are simmilar to those observed in chronically-infectedanimals or in mice injected in the epineurum with trypomastigotes, l7 dpi. Resultspresented here indicate the direct participation of autoantibodies in the pathology observedin PNS in chronic Chagas’ disease. To analyze the participation of TL in pathology in our model, we have studied the T cellreceptor Vβ (TCRVβ) repertoire in different tissues of chronically-infected mice. Overexpression of TCRVβ 13 and underexpression of TCRVβ l4 segments were observedin spleen of infected mice, suggesting that these peripheral TCRVβ usages can be markersof infection. In PNS tissues, it was deteceted a high number of segments expressed in thetarget organ of damage, reflecting the strong inflammatory infiltrate. There was an overrepresentation of TCRVβ 9 segment in sciatic nerve and spinal cord in RA- and in skeletalmuscle in CA-I-infected mice, showing a differential expression pattern between the targetorgan of disease and the peripheral repertoire. The sequence polymorphism analysis of the CDR3 region of over-expressed TCRVβ9segments showed a high proportion of identical clones in sciatic nerve and spinal cord in RA-infected mice, that could denote the presence of autoreactive TL. Moreover, theelevated production of pro-inflammatory cytokines in situ suggests that the local immuneresponse is contributing to the severe pathology observed in those organs. On the otherhand, clonal dominance was observed in TCRVβ9 segments not-over-expressed in thetissues that are not the main target of damage for each T. cruzi strain. This fact, togetherwith the fail to induce damage by passive cell transfer in these tissues, the presence ofparasite in situ and the low production of TNFα and IL-6, suggest that the the main clonesare directed to parasite antigens and contribute locally to the control of the infection.
Citación:
---------- APA ----------
Tekiel, Valeria. (2001). Autoinmunidad en la infección experimental por Trypanosoma cruzi. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3392_Tekiel
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Tekiel, Valeria. "Autoinmunidad en la infección experimental por Trypanosoma cruzi". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2001.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3392_Tekiel
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