Registro:
Documento: | Tesis Doctoral |
Disciplina: | quimica |
Título: | Influencia de la actividad neuronal sobre el desarrollo y trofismo de las células granulares del cerebelo en cultivo |
Autor: | Borodinsky, Laura Noemí |
Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
Lugar de trabajo: | Centro de Investigaciones Médicas Albert Einstein (CIMAE). Laboratorio de Neurociencias
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Publicación en la Web: | 2017-03-01 |
Fecha de defensa: | 1999 |
Fecha en portada: | 1999 |
Grado Obtenido: | Doctorado |
Título Obtenido: | Doctor en Ciencias Químicas |
Director: | Fiszman, Mónica Lidia |
Idioma: | Español |
Formato: | PDF |
Handle: |
http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3111_Borodinsky |
PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n3111_Borodinsky.pdf |
Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n3111_Borodinsky |
Ubicación: | BIO 003111 |
Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Borodinsky, Laura Noemí. (1999). Influencia de la actividad neuronal sobre el desarrollo y trofismo de las células granulares del cerebelo en cultivo. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3111_Borodinsky |
Resumen:
En este trabajo de tesis se presenta un estudio sobre los mecanismos por los cuales laactividad neuronal modularía el desarrollo y el trofismo del Sistema Nervioso Central. Se evaluó la influencia de concentraciones despolarizantes de KCI y de GABA sobre laproliferación de células granulares del cerebelo inmaduras y sobre la morfología y lasupervivencia de neuronas diferenciadas in Vitro. Se disecaron cerebelos de ratas de 6 a 8 díasde edad, y se obtuvieron suspensiones celulares que fueron sembradas en medio de cultivolibre de suero o bien en medio suplementado con un 10% de suero fetal bovino. Apartir de losestudios de incorporación de timidina ³H se observó que las células una vez sembradas poseenun pico proliferativo en las primeras 24 horas de cultivo, que desciende significativamente a las 48 horas y alcanza valores blanco luego de las 72 horas. El agregado de KCl 25 mM en elmomento de la siembra conduce a un aumento de la síntesis de ADN del 34 ± 4% (n: 14), yeste efecto es completamente bloqueado por MgCl2 10 mM y por nifedipina 10 μM (bloqueantede canales de Ca²+ tipo L). El GABA(0.1-100μM) también induce un incremento de laproliferación de las células granulares inmaduras (23 ± 1%, n: 10) y dicho efecto también esbloqueado por MgCl2 10 mM y por nifedipina 10 μM así como por bicuculina (antagonista dereceptores GABAa) y picrotoxina (bloqueante del canal de Clˉ). La preincubación con uninhibidor de la quinasa -MEK1- de la proteína quinasa activada por mitógeno (MAPK), PD98059, bloquea en forma efectiva la proliferación celular inducida por KCl 25 mM y GABA. El efecto proliferativo del KCl parece ser debido a una directa activación de los canales de Ca²+que se produce como consecuencia de la despolarización y no requiere de sustancias tróficaspresentes en el suero o de glutamato que se podría liberar como consecuencia de Iadespolarización. Por el contrario, el mecanismo por el cual el GABA aumenta la proliferación esmás complejo pues requiere de una membrana despolarizada y de la interacción de sustanciastróficas presentes en el suero. Al evaluar la influencia del GABA y de concentraciones despolarizantes de KCl sobre laneuritogénesis, se observó que ambos agentes producen un aumento de la complejidad de lared neurítica, cuantificada a través de la medición de la dimensión fractal de neuronas aisladassembradas por 48 horas en cultivos de baja densidad. Este efecto es bloqueado por elagregado de nifedipina 10 μM. El tratamiento de los cultivos con KCl 25 mM promueve la supervivencia neuronal a los 7 díasde la siembra, produciendo un incremento de la misma del 100 ± 20% (n: 6) cuando se lacompara con la supervivencia celular en cultivos crecidos en KCl 5 mM (condiciones de reposo). Este aumento fue bloqueado por MgCl2 y nifedipina, pero no fue bloqueado por PD98059. Porel contrario, el tratamiento con GABA no afecta la supervivencia neuronal. Se concluye que altasconcentraciones de KCl y el agregado de GABA inducen un aumento de la proliferación y de lacomplejidad neuronal debido al influjo de calcio a través de canales voltaje dependientes detipo L y la consecuente activación de la cascada de la MAPK. El hecho de que el GABA no afectela supervivencia neuronal parece estar relacionado con la pérdida de la capacidad del GABApara activar un influjo de calcio ya que el KCl sí aumenta la supervivencia. A diferencia de lo quesucede en el caso de la proliferación, el aumento de la supervivencia neuronal debido aconcentraciones despolarizantes de KCl no parece ser mediado por la cascada de la MAPK.
Citación:
---------- APA ----------
Borodinsky, Laura Noemí. (1999). Influencia de la actividad neuronal sobre el desarrollo y trofismo de las células granulares del cerebelo en cultivo. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3111_Borodinsky
---------- CHICAGO ----------
Borodinsky, Laura Noemí. "Influencia de la actividad neuronal sobre el desarrollo y trofismo de las células granulares del cerebelo en cultivo". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 1999.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3111_Borodinsky
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