Estudios bioquímicos y moleculares del metabolismo de fructanos en respuesta a estreses ambientales en Gramíneas nativas

Puebla, Andrea Fabiana

Registro:

Documento:	Tesis Doctoral
Disciplina:	biologia
Título:	Estudios bioquímicos y moleculares del metabolismo de fructanos en respuesta a estreses ambientales en Gramíneas nativas
Autor:	Puebla, Andrea Fabiana
Editor:	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Filiación:	Fundación para Investigaciones Biológicas Aplicadas (FIBA). Centro de Investigaciones Biológicas (CIB)
Publicación en la Web:	2015-03-18
Fecha de defensa:	1999
Fecha en portada:	1999
Grado Obtenido:	Doctorado
Título Obtenido:	Doctor en Ciencias Biológicas
Director:	Pontis, Horacio G.
Idioma:	Español
Tema:	biología/fisiología vegetal
Formato:	PDF
Handle:	http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3102_Puebla
PDF:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n3102_Puebla.pdf
Registro:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n3102_Puebla
Ubicación:	Dep.BIO 003102
Derechos de Acceso:	Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Puebla, Andrea Fabiana. (1999). Estudios bioquímicos y moleculares del metabolismo de fructanos en respuesta a estreses ambientales en Gramíneas nativas. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3102_Puebla

Resumen:

Se ha estudiado la respuesta a estrés por bajas temperaturas y déficit hídrico en Gramíneas nativas de regiones con climas contrastantes de la Argentina. Elmodelo de trabajo se basó en el análisis comparativo del metabolismo defructanos y sacarosa en relación con estreses abióticos en especies nativas de Patagonia y otras del mismo género adaptadas a regiones con climas másbenignos. Bromus pictus y Bromus auleticus, se compararon como especiespatagónicas y del centro y norte de Argentina, respectivamente. Se analizaron losazúcares que contienen fructosa en plantas control y tratadas. Se estudiaron lospatrones de fructanos y se determinó la composición de oligosacáridos de ambasespecies. Se estudiaron las enzimas del metabolismo de sacarosa y fructanos. Semidieron la actividad de las enzimas SPS, SS, INV y SST. La actividad SSTmostró aumentos constantes frente al estrés por frío en la especie patagónica. Sedesarrollo un nuevo método enzimático-colorimétrico para medir la actividad SST. Se estudiaron algunas propiedades bioquímicas de esta actividadparcialmente purificada de vástagos de B. pictus tratados a 4 °C. La actividad SST de Bromus pictus mostró un pH óptimo entre 5,5 y 6, no se saturó a altasconcentraciones de sacarosa y mantuvo el 55% de la actividad a 30°C enincubaciones realizadas a 0°C. Se realizaron estudios de homología y expresión apartir de ácidos nucleicos de plantas de B. pictus tratadas con bajas temperaturas utilizandosondas heterólogas de la 6-SFT de cebada. Se demostró que en laespecie patagónica hay secuencias homólogas de ADN y ARN a las existentes encebada. Por la técnica de RT-PCR se clonó un fragmento de 760 pb del ADNc de Bromus pictus usando oligonucleótidos específicos en zonas altamenteconservadas en otros genes de fructosil transferasas. La comparación desecuencias mostró una alta homología con la 6-SFT de cebada, con otras enzimasdel metabolismo de fructanos de mono y dicotiledóneas y con INV ácidas deplantas.

Abstract:

Low temperature and water stress treatments were assayed in plants of variousspecies of Gramineae, belonging to different regions of Argentina. Theexperimental model was based in comparative studies of fructan and sucrosemetabolism in relation with the abiotic stresses in native plants from Patagoniaand other species of the same generous adapted to northern regions of Argentinawith mild climatic conditions. Bromus pictus and Bromus auleticus werecompared as patagonic and northern species respectively. Fructose-containingsugars were analysed. The fructan pool was studied and oligosaccharidecomposition was determined. Sucrose and fructan enzymes were studied. SPS, SS, INV and SST were assayed in control and treated plants in both Bromusspecies. Increasing levels of SST activity were observed in patagonic plantsexposed to low temperature. A novel enzymatic-colorimetric method to assay SST activity was developed. Some biochemical properties of SST activitypartially purified from shoots of Bromus pictus treated with low temperatures,were studied. SST activity of Bromus pictus has pH optimum between 5,5-6,was non-saturated at high concentrations of sucrose and maintained high activityat 0°C. Southern and northern analysis were made with tissues of lowtemperature treated plants of Bromus pictus, using the ADNc of barley 6-SFT asa probe. Bromus sequences of DNA and RNA hybridised with the ADNc ofbarley. A ADNc fragment of Bromus pictus was cloned by RT-PCR usingspecific primers with high homology with plant fructosyltransferases. Sequencecomparison has shown a high homology of the ADNc fragment with the ADNcof barley 6-SFT, other mono and dicotyledon fructan genes and acid invertases ofplants.

Citación:

---------- APA ----------

Puebla, Andrea Fabiana. (1999). Estudios bioquímicos y moleculares del metabolismo de fructanos en respuesta a estreses ambientales en Gramíneas nativas. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3102_Puebla

---------- CHICAGO ----------

Puebla, Andrea Fabiana. "Estudios bioquímicos y moleculares del metabolismo de fructanos en respuesta a estreses ambientales en Gramíneas nativas". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 1999.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3102_Puebla

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