La reacción acrosomal inducida por fluido folicular como medida de la capacidad funcional del espermatozoide humano

Piñeiro de Calvo, Lucrecia

Registro:

Documento:	Tesis Doctoral
Disciplina:	biologia
Título:	La reacción acrosomal inducida por fluido folicular como medida de la capacidad funcional del espermatozoide humano
Título alternativo:	Follicular fluid-induced acrosome reaction as a measure of human sperm function
Autor:	Piñeiro de Calvo, Lucrecia
Editor:	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Filiación:	Genetics & IVF Institute
Publicación en la Web:	2019-03-29
Fecha de defensa:	1998
Fecha en portada:	1998
Grado Obtenido:	Doctorado
Título Obtenido:	Doctor en Ciencias Químicas
Director:	Sherins, Richard J.
Director Asistente:	Charreau, Eduardo H.
Idioma:	Español
Palabras clave:	ESPERMATOZOIDE HUMANO; REACCION ACROSOMAL; FLUIDO FOLICULAR; FIV; FUNCIONALIDAD ESPERMATICA; PISUM SATIVUMHUMAN SPERMATOZOON; ACROSOME REACTION; FOLLICULAR FLUID; IVF; SPERM FUNCTION; PISUM SATIVUM
Tema:	biología/fisiología humana biología/reproducción
Formato:	PDF
Handle:	http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3086_PineirodeCalvo
PDF:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n3086_PineirodeCalvo.pdf
Registro:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n3086_PineirodeCalvo
Ubicación:	Dep.BIO 003086
Derechos de Acceso:	Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Piñeiro de Calvo, Lucrecia. (1998). La reacción acrosomal inducida por fluido folicular como medida de la capacidad funcional del espermatozoide humano. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3086_PineirodeCalvo

Resumen:

El objetivo de este trabajo fue evaluar el uso de un ensayo de reacción acrosomal (RA) en respuesta afluido folicular humano (hFF) como indicador de funcionalidad espermática. Se establecieron lascondiciones óptimas de ensayo utilizando espermatozoides de donantes fértiles. Se evaluó la influenciade la composición del medio de capacitación sobre hFF-RA: la naturaleza del suplemento proteico, perono así la composición iónica, afectó considerablemente los resultados del ensayo. Se estudió hFF-RA en 58 hombres fértiles y 232 pacientes infértiles. El %RA (diferencia entre losporcentajes de espermatozoides reaccionados en presencia y ausencia de hFF) en la población normalpresentó una distribución Gaussiana, con una media de (17±1)%. El intervalo de confianza (IC) del 95%para %RA indicó que valores inferiores al 5% se encontraban fuera del rango normal. El %RA fue mayorque 9% en 83% de los individuos normales y sólo el 2% de los mismos tuvo un %RA anormal (<5%). Secalculó la variabilidad intraindivíduousando múltiples muestras de cada donante, obteniéndose un IC del 95% de ±4 unidades de RA con respecto ala media individual. El %RA en la población infértil no presentóuna distribución Gaussiana, y el valor de su mediana fue 3%. El 60% de los pacientes presentó un %RAfuera del rango normal (<5%) y sólo el 26% de los mismos tuvo un %RA mayor de 9%. Como lospacientes ingresaron al estudio en forma secuencial, sin importar la etiología de su infertilidad, lapoblación estudiada fue muy heterogénea e incluyó individuos con un amplio espectro de caracteristicasseminales. Se observó un aumento progresivo en el número de pacientes con %RA < 5% (RA-) a medidaque se deterioró la calidad del semen. Sin embargo, 20% de los pacientes con buen semen fueroninesperadamente RA-, mientras que 29% de los pacientes con semen deficiente fueron RA+ (%RA > 5%). Así, a pesar de que hubo correlación significativa entre %RA y otros parametros seminales, %RA nofue predecible a partir de los datos de un espermograma tradicional. Se analizó la capacidad de %RA para predecir el éxito en FIV mediante un estudio prospectivo. Lamediana del % de ovocitos fertilizados aumentó con %RA: los pacientes RA- fertilizaron solamente 12%ovocitos, mientras que los pacientes con %RA > 9% fertilizaron 50% de los ovocitos. La sensibilidad delensayo fue 0,75, su especificidad 0,55 y su razón de probabilidades 2,9; asi, la posibilidad de fertilizar unovocito fue 2,9 veces mayor para los pacientes RA+ que para los RA-. Cuando los pacientes sedividieron en cuatro grupos de acuerdo con sus parametros seminales, el % de ovocitos fertilizadosdisminuyó al deteriorarse las caracteristicas del semen. Sin embargo, dentro de cada subgrupo, lamediana del % de ovocitos fertilizados fue 3 a 4 veces mayor en pacientes RA+ que en RA-, indicandoque la RA tuvo un efecto mayor sobre el exito en FIV que los parámetros tradicionales del semen. Se trató de construir un modelo predictivo del éxito en FIV, considerando una serie de parámetros defertilidad, tanto en el hombre como en la mujer. Los resultados obtenidos en las fases de Construcción y Validación del modelo mostraron que %RA tenia la mayor correlación con el éxito en FIV y que lainclusiónde cualquiera de los otros parámetros evaluados, no añadía poder estadístico al modelo. Los datos aqui presentados indican que %RA es una medida estable de la función espermática y tiene unvalor predictivo mayor para el exito en FIV que el espermograma tradicional, incluyendo la morfología concriterios estrictos. Si bien la capacidad fertilizante no puede predecirse adecuadamente a través de unúnico parámetro del espermatozoide, la determinación de hFF-RA parecería ser una herramienta útilenla evaluación de la posibilidad de exito de un paciente en FIV.

Abstract:

The aim of this study was to evaluate the potential use of an acrosome reaction (AR) assay in response tohuman follicular fluid (hFF) as a sperm function diagnostic tool. Optimum assay conditions wereestablished using sperm from normal fertile men. The influence of media composition on AR inducibilitywas assessed: protein supplementation in the capacitation medium, but not ionic composition, stronglyaffected assay results.hFF-AR was analyzed in 58 normal fertile men and 232 infertile patients. ΔAR (% reacted sperm in thepresence of follicular fluid - % reacted sperm in control) in the normal population followed a Gaussiandistribution, with a mean of (17±1)%. The 95% Confidence Interval (CI) for ΔAR showed that values under 5% would be outside the normal range. ΔAR was greater than 9% in 83% of the normal subjects studiedand only 2% of fertile individuals had a failed ΔAR (<5%). Within person variability was calculated usingmultiple specimens from each subject and rendered a 95% CI of 4 AR units above and below his meanvalue. ΔAR in the infertile population did not follow a Gaussian distribution, and its median value was 3%. ΔAR values were below the normal range (<5%) in 60% of the patients and only 26% of the patients hadvalues over 9%. Because patients entered the study sequentially, regardless of the aetiology of infertility,the patient population comprised a wide variety of subjects ranging from individuals with good to extremelypoor semen quality. There was a progressiver greater number of individuals with ΔAR < 5% (AR-) assemen quality deteriorated. However, among patients with good semen values, 20% were unexpectedly AR-, and among patients with severer impaired semen quality, 29% had ΔAR > 5% (AR+). Thus, eventhough there was a significant correlation between ΔAR values and other semen measurements. ΔARcould not be predicted from conventional semen analysis. The ability of ΔAR to predict fertilization success in IVF was analyzed prospectively. The medianpercentage of eggs fertilized increased as ΔAR became greater: spermatozoa from AR- patients fertilizedonly 12% of eggs, while spermatozoa with ΔAR > 9% fertilized 50% of eggs. The assay had a sensitivityof 0.75, a specificity of 0.55 and an odds ratio of 2.9; thus. AR+ patients were 2.9 times more likely toachieve fertilization at IVF than AR- patients. When patients were divided into four clearly definedsubgroups according to their semen characteristics, the median percent eggs fertilized decreased assemen characteristics deteriorated. However, within each patient subgroup, the median percent eggsfertilized was 3- to 4- fold higher for AR+ than for AR- patients, indicating that AR had a greater effect onfertilizationthan traditional semen parameters. An attempt was made to construct a model to predict fertilization success at IVF taking into account series of fertility parameters, both male and female. Results obtained in the Construction and Validation phasesof the study showed that ΔAR had the highest correlation with fertilization success at IVF and that theinclusion of any of the other parameters evaluated in the model, added no statistical benefit. Though it is necessary to acknowledge that fertility potential cannot be predicted accurater measuring asingle sperm parameter, the data presented indicate that ΔAR is a stable measure of sperm function andhas a much higher predictive value for IVF success than traditional semen parameters, including spermmorphology by strict criteria. hFF-AR assessment seems to be a clinically useful diagnostic tool indetermining a patient's likelihood of achieving fertilization at IVF.

Citación:

---------- APA ----------

Piñeiro de Calvo, Lucrecia. (1998). La reacción acrosomal inducida por fluido folicular como medida de la capacidad funcional del espermatozoide humano. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3086_PineirodeCalvo

---------- CHICAGO ----------

Piñeiro de Calvo, Lucrecia. "La reacción acrosomal inducida por fluido folicular como medida de la capacidad funcional del espermatozoide humano". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 1998.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n3086_PineirodeCalvo

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