Registro:
Documento: | Tesis Doctoral |
Disciplina: | quimica |
Título: | Análisis estructural y bioquímico de la región gum de Xanthomonas campestris pv. campestris |
Autor: | Katzen, Federico |
Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
Lugar de trabajo: | Instituto de Investigaciones Bioquímicas "Fundación Campomar"
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Publicación en la Web: | 2017-03-01 |
Fecha de defensa: | 1998 |
Fecha en portada: | 1998 |
Grado Obtenido: | Doctorado |
Título Obtenido: | Doctor en Ciencias Químicas |
Departamento Docente: | Departamento de Química Biológica |
Director: | Ielpi, Luis |
Idioma: | Español |
Formato: | PDF |
Handle: |
http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2994_Katzen |
PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n2994_Katzen.pdf |
Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n2994_Katzen |
Ubicación: | 002994 |
Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Katzen, Federico. (1998). Análisis estructural y bioquímico de la región gum de Xanthomonas campestris pv. campestris. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2994_Katzen |
Resumen:
El xantano es un exopolisacárido acídico con importantes aplicaciones industriales producido por la bacteriagram-negativa fitopatógena Xamhomonas campestris pv. campestris. Está compuesto por unidadespentasacarídicas repetitivas que son ensambladas en orden secuencial a través del agregado de los residuosglucosa-1-fosfato, glucosa, manosa, ácido glucurónico, y manosa a un intermediario poliprenol-fosfato. Se hasugerido que una región que comprende 12 marcos abiertos de lectura denominada xpsl o gum, codifica lasproteínas responsables del ensamblado de la unidad repetitiva y de la polimerización del xantano. Sin embargo,hasta el momento no se ha publicado evidencia experimental que avale tal proposición. En esta tesis, mediante elanálisis de un conjunto definido de mutantes de X. campestris se muestran datos experimentales para la asignaciónde funciones bioquímicas a los genes de la región gum. Además, se analiza la organización transcripcional de estaregión a través de la construcción de fusiones transcripcionales gum-lacZ en combinación con mutagénesis porintegración plasmídica. Estos análisis combinados con ensayos de primer extension y de RT-PCR, indicaron quela región gum es transcripta como un operón desde un promotor ubicado río arriba del primer cistrón gumB,extendiéndose hasta la finalización del gen gumM. Por último, ensayos de virulencia mostraron que alteracionesen las últimos pasos de la biosíntesis del xantano reducen la agresividad de X. campestris contra su hospedador.
Abstract:
Xanthan is an industrially important acidic exopolysaccharide produced by the phytopathogenic gram-negativebacterium Xanthomonas campestris pv. campestris. It is composed of polymerized pentasaccharide repeatingunits, which are assembled by the sequential addition of glucose-1-phosphate. glucose. mannose, glucuronic acid,and mannose on a polyprenol-phosphate carrier. A cluster of 12 genes, in a region designated xpsl or gum, hasbeen suggested to encode proteins involved in the synthesis and polymerization of the lipid intermediate. However, no experimental evidence supporting this suggestion, has been published. In this thesis, from thebiochemical analysis of a defined set of X. campestris gum mutants, experimental data for assigning function tothe products of the gum genes are reported. In addition, the transcriptional organization of the gum region wasanalyzed by the construction of gum-lacZ transcriptional fusions in association with plasmid integrationmutagenesis. This analysis, coupled with primer extension and RT-PCR assays, indicated that the gum region wasmainly transcribed as an operon from a promoter located upstream of the first gene, gumB finishing downstreamof the gumM gene. Finally, virulence tests showed that alterations in the later stages of xanthan biosynthesisreduce the aggressiveness of X. campestris against the plant.
Citación:
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Katzen, Federico. (1998). Análisis estructural y bioquímico de la región gum de Xanthomonas campestris pv. campestris. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2994_Katzen
---------- CHICAGO ----------
Katzen, Federico. "Análisis estructural y bioquímico de la región gum de Xanthomonas campestris pv. campestris". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 1998.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n2994_Katzen
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