Registro:
Documento: | Tesis Doctoral |
Disciplina: | quimica |
Título: | Quimioluminiscencia en sistemas biológicos |
Autor: | Varsavsky, Alicia Inés |
Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
Lugar de trabajo: | Universidad de Buenos Aires - Facultad de Farmacia y Bioquímica - Departamento de Química Biológica - Cátedra de Físico Química
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Publicación en la Web: | 2017-11-06 |
Fecha de defensa: | 1983 |
Fecha en portada: | 1983 |
Grado Obtenido: | Doctorado |
Título Obtenido: | Doctor en Ciencias Químicas |
Departamento Docente: | Departamento de Química Biológica |
Director: | Boveris, Alberto |
Idioma: | Español |
Formato: | PDF |
Handle: |
http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n1795_Varsavsky |
PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n1795_Varsavsky.pdf |
Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n1795_Varsavsky |
Ubicación: | 001795 |
Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Varsavsky, Alicia Inés. (1983). Quimioluminiscencia en sistemas biológicos. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n1795_Varsavsky |
Resumen:
La luminiscencia de baja intensidad en sistemas biológicos refleja directa o indirectamente procesos de peroxidación lipidica (Boveris y col., 1930 a, Cadenas y col., 1980 a). Si bien habia abundante información sobre la de algunos sistemas como leucocitos polimorfonucleares (Nakínumay col., 1979), peroxidasa de rábano con isobutiraldehido (Cilento, 1980), lipoxigenasa con ácido linoleico (Boveris y col., 1980 b), era muy poca la información que habia sobre la emisión de sistemas más complejos, especialmente órganos de mamíferos “in situ" y semillas enteras. Las técnicas de conteo de fotones están desarrolladas, especialmente en lo que a contadores de centelleo se refiere, pero recién en los últimos 10 años se han comenzado a aplicar a la medición de emisiones de baja intensidad en sistemas biológicos. La variedad de instrumentos empleados en dichas medidas hizo interesante la comparación de sus rendimientos y propiedades. Se han comparado las medidas obtenidas para sistemas de emisión constante y variable con el tiempo con cinco instrumentos diferentes (tres contadores de centelleo con el circuito de coincidencia desconectado y dos contadores de fotones). Los valores de las emisiones medidas dependen de las caracteristicas geométricas del aparato (área del fototubo, distancia de la muestra a1 tubo, área de la zona emisiva). Se ha hallado entre los aparatos empleados una buena reprodutibilidad de las cinéticas y de los espectros de emisión. El estudio de las emisiones de sistemas en solución simple (cítocromo c en presencia de hidroperóxidos, o lipoxigenasa con ácido linoleico), o complejos (homogeneizados de órganos, o de semillas de soja, mitocondrias de higado) indican que la emisión depende de la temperatura y de la concentración de oxigeno y de reactivos. Todas las emisiones son inhibidas por cianuro de potasio y por el atrapador de radicales libres di-ter butil quinol. En sistemas que contenían lipoxigenasa, el ácido salicil hidroxámico, inhibidor selectivo de dicha enzima también inhibió la emisión. Los sistemas enteros (órganos "in situ", semillas) tienen emisiones de intensidad mucho menor que los sistemas en solución. Agentes adecuados (como CCl4 en el caso de órganos "in situ" y agua o diversos solventes orgánicos en el caso de semillas) aumentaron significativamente las emisiones. El estudio de las distribuciones espectralos de las emisiones detectadas no permiten identificar inequívocamente las especies foto emisivas. De acuerdo con las teorias más aceptadas (Boveris y col., 1980 n. Cadenas y col., 1980 a,b,c; Denekey Krinsky, 1977; Inaba y 001., 1979) las especies que podrian llegar a emitir son carbonilos excitados que emiten en la región de 400 - 500 nm y el oxigeno excitado cuyas emisiones más caracteristicas están a 634 y 703 nm (Khan y Kasha, 1963). Ninguna de las distribuciones espectrales estudiadas (homogeneizados de higado y cerebro de rata, mitocondrias de higado de rata, higado de rata "in situ", semillas de soja, usando agentes inductorea adecuados para cada caso) responde a estos patrones. En algunos casos (órganos "in situ" y semillasenteras) el alto porcentaje de luz roja y el efecto del DABCO(que aumenta la emisión luminosa debida a la emisión bimolecular del oxigeno excitado sin alterar el espectro de la emisión, Deneke y Krinsky, 1977) haria pensar que el oxigeno singulete es como una de las especies emisoras. Cuanto mayor es la integridad del sistema emisor, mayor es el porcentaje de luz roja en la emisión. Por otra parte son más importantes en la distribución espectral de la emisión las caracteristicas del emisor que las del inductor. Una de las grandes ventajas de los estudios de quimioluminiscencia de baja intensidad, es su carácter de no invasiva, lo cual, en la mayoria de los casos permite recuperar la muestra en las condiciones originales.
Citación:
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Varsavsky, Alicia Inés. (1983). Quimioluminiscencia en sistemas biológicos. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n1795_Varsavsky
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Varsavsky, Alicia Inés. "Quimioluminiscencia en sistemas biológicos". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 1983.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n1795_Varsavsky
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