Registro:
| Documento: | Tesis Doctoral |
| Disciplina: | quimica |
| Título: | La propagación de bacterias del género Brucella en cultivos de células animales |
| Autor: | Brunengo, Ana María Francisca |
| Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
| Publicación en la Web: | 2017-11-06 |
| Fecha de defensa: | 1964 |
| Fecha en portada: | 1964 |
| Grado Obtenido: | Doctorado |
| Título Obtenido: | Doctor en Ciencias Químicas |
| Idioma: | Español |
| Tema: | química/química biológica
|
| Formato: | PDF |
| Handle: |
http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n1246_Brunengo |
| PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n1246_Brunengo.pdf |
| Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n1246_Brunengo |
| Ubicación: | Dep.001246 |
| Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Brunengo, Ana María Francisca. (1964). La propagación de bacterias del género Brucella en cultivos de células animales. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n1246_Brunengo |
Resumen:
El presente trabajo se ha realizado con la intención de cultivar Brucella abortus cepa B19 en medio líquido y en forma continua o semi-continua con miras a la obtención de vacuna contra la brucelosis bovina. La primera parte, se detalla: el material, en medios de cultivo y técnicas empleadas, tanto para la obtención de los cultivos celulares y sus mantenimiento, como para el crecimiento de las bacterias en ellos y sus determinaciones cuantitativas. La tercer parte, es experimental y reproduce las técnicas empleadas para tratar de conseguir el objetivo previsto en el presente trabajo. Se ha demostrado el carácter intracelular de la Brucella abortus realizando experiencias en monocapas de células de riñón de cerdo; previa eliminación de la infección extracelular. En efecto, se probó que las bacterias habían penetrado en la célula cuando la infección era masiva y que continuaban liberándose si se hacían incubaciones sucesivas con cambio de medio de cultivo. Se sembraron tubos de Leighton que se fotografiaron antes y después de la infección con Br. abortus, con esto se demostró que dicha bacteria afecta intensamente a las células de riñón de cerdo, destruyéndolas y desprendiéndolas del vidrio. Se colocaron monocapas celulares bajo distintas condiciones y se estudió su influencia sobre el crecimiento de la Br. abortus, quedando demostrado que ella no existe cuando se las emplea como extracto calentado o como desintegrado ultrasónico. Se realizaron pasajes sucesivos en tubos de monocapas de riñon de cerdo concluyéndose que existe una cierta adaptación de la Br.abortus a las células sobre las cuales se desarrolla, ya que se ha obtenido en todos los casos un aumento progresivo del número de bacterias viables presentes. En estos mismos pasajes se estudiaron los tiempos óptimos de cultivo realizándose cuentas de colonias, demostrándose que el tiempo óptimo de cultivo era de 4 días a 37°C para Br. abortus cultivadas en monocapas de riñón de cerdo. Se estudiaron los distintos pasajes desde el punto de vista antigénico, quedando demostrado que las bacterias obtenidas en cultivos sucesivos en número no menor de 11 poseen estabilidad de antígeno; lo cual representa una ventaja para un cultivo en masa. Se inocularon pasajes alternados en cobayo realizado luego pruebas de aglutinación, quedando demostrado que poseen muy buenas propiedades antigénicas para los mismos, comparados con experiencias semejantes realizadas con cultivos de Br.abortus provenientes de medios sólidos. Para tratar de conseguir cultivos continuos o semi-continuos trabajamos en monocapas de células de riñon de cerdo en frsco de Roux. Ello es posible pero resta por resolver la poca estabilidad de la capa celular por destrucción de las mismas debido a la acción bacteriana enérgica. Es factor adverso el hecho que se obtenga poca concentración de bacterias, pero hacemos incapié en que se podría subsanar ello trabajando en condiciones mejores, tales como agitación mecánica o burbujeo de oxígeno, dando así mejor rendimiento. Trabajamos posteriormente con cultivos en suspensión, los resultados no del todo satisfactorios no son obvise para desechar las experiencias realizadas, de por sí pocas, pués se podría aquí también mejorar las condiciones de trabajo con agitación con oxígeno y estudio de la relación suspensión de células a volumen total. Suspensiones bacterianas obtenidas por desarrollo en cultivos celulares en botella de Roux y posteriormente concentradas hasta obtener las cantidades de bacterias que requieren las normas internacionales fueron inoculadas a terneras, pudiéndose computar como buenos antígenos para ellas. Queda pendientes realizar un ensayo de liofilización confirmado o negado el hecho comprobado de que los cultivos provenientes demedios líquidos por razones aún no establecidas son menos estables a la desecación.
Citación:
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Brunengo, Ana María Francisca. (1964). La propagación de bacterias del género Brucella en cultivos de células animales. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n1246_Brunengo
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Brunengo, Ana María Francisca. "La propagación de bacterias del género Brucella en cultivos de células animales". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 1964.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n1246_Brunengo
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