Resumen:
Como los disacáridos acetilados empleados por Deferrari y Cadenas tenian unión glicosídica l-4, lo cual determinaba que enla mitad reductora que experimentaba la reacción de migración deacetilos se eliminase la posibilidad de la formación de una N-acetilaldobiosilamina con ciclo furanósico y además, la carenciadel acetilo del carbono 4 eliminaba una participación que podíapensarse era importante en base a las experiencias realizadas por Gros, Ondetti, Sproviero, Deulofeu y Deferrari con la l,2,3,4,6-penta- O-benzoil-D-glucosa y la 2,3,4,6-tetra-0-benzoil-D-glucosamarcadas con benzoilos carbonilo C^14 en distintas posiciones, yen las cuales se establecía en 0,8l+-0,02 la participación delbenzoílo del carbono 4 en la formación de N,N'-dibenzoil-D-glucosilidéndiamina,hemos considerado interesante extender el estudiode la reacción del amoniaco a los derivados acetilados con uniónglicosídica 1-6, tales como la melibiosa y la genciobiosa. El interés del estudio de la reacción del amoniaco sobre losdisacáridos acetilados con unión glicosídica 1-6 residía en quese podía determinar el efecto que en el curso de la misma teníala presencia de un acetilo en el carbono 4 de la mitad reductoradel disacárido que experimentaba la reacción de migración de acetilos,el cual por extensión de los establecido por Deulofeu ycolaboradores podria tener la misma participación en la formaciónde N-acetil aldosilaminas que el benzoílo en el carbono 4 en elcaso de la N,N'-dibenzoil glucosilidéndiamina. Además,el hecho de que por eliminación del acetilo del carbono 4 quedara libre un hidroxilo en esa posición, posibilitaría laformación de N-acetil aldobiosilaminas con un ciclo furanósico asemejanza de lo que ocurría con la penta-O-acetil-al-D-glucosa,la penta-O-acetil-β-D-glucosa y el hexa-O-acetil-D-glicero-D-guloheptononitrilo, los cuales tratados con amoníaco producían la N-acetil glucofuranosilamina. También podia esperarse un aumento en el rendimiento de la N,N'-diacetil aldobiosilaminas por el hecho de sustituirse la pequeñaparticipación del acetilo del carbono 6 por la importanteparticipación del acetilo del carbono 4, teniendo en cuenta queen la formación de N,N'-dibenzoil-D-glucosilidéndiamina la contribucióndel grupo 6-0-benzoilo es 0,3 moles mientras que 1a del 4-O-benzoilo es de 0,8 moles. Asimismo se podía conocer la influenciaque en el curso de la reacción tendría un grupo voluminosocomo es el resto no reductor unido al carbono 6 de la parte reductoradel disacárido. Desde el punto de vista preparativo se podia pensar en obtenerlas N,N'-diacetil aldobiosilidéndiaminas y las N-acetil aldobiosilaminasde los disacáridos con unión glicosídica 1-6. La preparación de la octa-O-acetil melibiosa necesaria paraestos experimentos se hizo por acetilación del azúcar libre siguiendola técnica de Scheibler y Mittelmeier. La reacción de la octa-O-acetil melibiosa con amoníaco la efectuamosen distintos medios, aunque en las mismas condiciones operativas. De 1a reacción de la octa-O-acetil melibiosa con amoníacoacuoso al 25% obtuvimos un jarabe del que separamos porcromatografía en columna de carbón y con rendimiento de 7,7%la forma α de la melibiosa, análoga a la descripta por Fletchery Diehl, y N-acetil melibiosilamina con rendimiento de 22,5%. La amonólisis de la octa-O-acetil melibiosa con amoníacoacuoso al 33% dio un jarabe del cual por acetilación con anhídridoacético y piridina aislamos octa-O-acetil melibiosa idénticaa la descripta anteriormente con un rendimiento de 1,6% yun jarabe que cromatografiado en columna de talco celite dio con 5,8 % de rendimiento la octa-O-acetil-N,N'-diacetil melibiosi-lidéndiamina. Del jarabe obtenido en la reacción de la octa-O-acetil melibiosacon amoníaco metanólico 16% obtuvimos por acetilación 13,3%de octa-O-acetil melibiosa y 5% de octa-O-acetil-N,N'-diacetilmelibiosilidéndiamina y por cromatografía en columna de celulosaaislamos con 4,5% de rendimiento la forma α de 1a melibiosay N-acetil melibosilamina con un rendimiento de 0,27%. La acetilación de la N-acetil melibiosilamina con anhídridoacético y piridina dio la hepta-O-acetil-N,acetil melibiosilamina. La octa-O-acetil genciobiosa la preparamos condensando deacuerdo a la técnica de Reynolds y Evans la 1-α-bromo-2,3,4,6-tetra- O-acetil-D-glucopiranosa con la l,2,3,4-tetra-0-acetil-D-glucosa. La amonólisis de la octa-O-acetil genciobiosa con amoníacoacuoso al 25% dio un jarabe del cual pudimos aislar por cromatografía en carbón 1a N,N'-diacetil genciobiosilidéndiaminacon un rendimiento del 8,5% y por cromatografía en celulosa 29% de la N-acetil genciobiosilamina en forma de un productoamorfo e higroscópico. La acetilación de la N,N'-diacetil genciobiosilidéndiaminacon anhídrido acético y piridina dio la octa-O-acetil-N,N'diacetilgenciobiosilidéndiamina. Los resultados obtenidos en la reacción del amoníaco con losdisacáridos acetilados de unión glicosídica 1-6 estudiados pornosotros están estrechamente vinculados al análisis del comportamientode la penta-O-acetil-β-D-glucosa con dicho reactivo,por cuanto la melibiosa y la genciobiosa son 6-O-glicopiranosil-D-glucopiranosas, es decir, que la parte que experimenta la reacciónde migración de acetilos en dichos octa-O-acetil disacáridoses una l,2,3,4-tetra-O-acetil-glucosa sustituída en el carbono 6por un resto 2,3,4,6-tetra-O-acetil glucopiranosilo. Cabe destacar que en los casos estudiados, la N,N'-diacetilaldobiosilidándiamina se produce con un rendimiento menor queen el de la amonólisis en medio acuoso de la octa-O-acetil maltosa;que las N-acetil aldobiosilaminas se producen con un rendimientomucho mayor que el obtenido con los disacáridos acetiladosde unión glicosidica l—4, y que el rendimiento de azúcareslibres fue menor que en el caso de los acetatos de maltosa,lactosa y celobiosa. La formación de N,N'-diacetil melibiosilidéndiamina en cantidadde 5%en medio metanólico es del mismo orden que en elcaso de los disacáridos con unión glicosidica l-4 y podria considerarsecomo un resultado similar al obtenido con la penta-O-acetil-β-D-glucosa que por tratamiento con amoniaco metanólicoda N,N'-diacetil glucosilidéndiamina con solo 8% de rendimientoademás de 12% de la N-acetil-D-glucopiranosilamina. En la amonólisis en medio acuoso los rendimientos de N,N'-diacetilmelibiosilidéndiamina(5,8%)y N,N'-diacetil genciobiosilidéndiamina (8,5%) son del mismo orden entre si, pero muchomenores que el obtenido en el caso de la octa-O-acetil maltosaque en esas condiciones produjo 27% de N,N‘-diacetil maltosilidéndiamina. El rendimiento de 22,5% de N-acetil melibiosilamina y de 29%de N-acetil genciobiosilamina obtendios en nuestras experienciascon amoníaco acuoso comparado con el obtendio en la reaccióndel amoníaco acuoso con la penta-O-acetil-β-D-glucosa que da 41% de N-acetil glucofuranosilamina podría explicarse si se consideraque en la penta-O-acetil-β-D-glucosa los 4 acetilosubicados en los carbonos 2,3,4 y 6 tienen posibilidades de migrar,mientras que en la octavo-acetil melibiosa y en la octa-O-acetil genciobiosa solamente los 3 acetilos ubicados en loscarbonos 2, 3 y 4 podrian migrar al carbono 1. Es decir, que enrelación a 1a penta-O-acetil glucosa faltaria solo la contribucióndel acetilo del carbono 6, la cual podria ser poco importantesi se postula que éste contribuiria en una forma similara la del benzoilo ubicado en la misma posición en el caso de lapenta-O-benzoil-β-D-glucopiranosa.Ello hace pensar que no podríaser ésta la única razón por la cual en la amonólisis dela octa-O-acetil melibiosa y la octa-O-acetil genciobiosa elrendimiento de N-acetil aldobiosilamina es prácticamente la mitaddel obtenido con la β-penta-0-acetil glucosa; esta diferenciadeberia ser atribuida entonces al factor estérico debido ala presencia del grupo voluminoso 2,3,4 ,6-tetra-0-acetil-D-glucopiranosilounido al carbono 6 de la parte reductora de estosdisacáridos. Por otra parte el hecho que se haya obtenido unrendimiento elevado de N-acetil melibiosilamina y de N-acetilgenciobiosilamina en relación a las N,N'-diacetil aldobiosilidéndimainasseria explicable considerando que el resto reductorque sufre la reacción de transposición de acilos es una unidadde glucosa que presenta la posibilidad de formar un ciclo l-4,que como ya hemos señalado es de fácil formación, lo que haríafactible que la reacción pudiera producirse en ese sentido. A pesar que aún no hemos podido demostrar la estructura delciclo de la N-acetil melibiosilamina y la N-acetil genciobiosilamina,la formación de un ciclo piranósico, aunque posible, nosparece menos probable, en razón del comportamiento de la penta-0-acetil-β-D-glucosa, la cual da N-acetil glucofuranosilamina yde los bajos rendimientos(menos del 1%) de N-acetil aldobiosilaminascon ciclos piranósicos obtenidos en la amonólisis de losdisacáridos acetilados con unión glicosídica l-4, en los cualessólo podía formarse al ciclo piranósico por estar la posición 4comprometida en la unión glicosídica. En función de que los rendimientos de N,N'-diacetil aldobiosilidéndiaminas y N-acetil aldobiosilaminas son cercanos a losque podian esperarse si solamente contribuyera la mitad reductora,nos parece que fundamentalemte el mecanismo de migraciónde acetilos deberia verificarse en dicha mitad, pero no podemosdescartar la posibilidad de una contribución de los acetilos ubicadosen la otra parte de la molécula. El estudio de un modelo molecular del producto de adicióndel amoníacoa la octa-O-acetil-genciobiosa Consulte el resumen completo en el documento.
