Efectos del antibiótico cicloheximida sobre el metabolismo de Saccharomyces cerevisiae var. ellipsoideus

Widuczynski, Isaac

Registro:

Documento:	Tesis Doctoral
Disciplina:	quimica
Título:	Efectos del antibiótico cicloheximida sobre el metabolismo de Saccharomyces cerevisiae var. ellipsoideus
Autor:	Widuczynski, Isaac
Editor:	Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales
Filiación:	universidad de Buenos Aires - Facultad de Ciencias Médicas - Instituto de Química Biológica
Publicación en la Web:	2017-11-06
Fecha de defensa:	1963
Fecha en portada:	1963
Grado Obtenido:	Doctorado
Título Obtenido:	Doctor en Ciencias Químicas
Director:	Stoppani, Andrés O. M.
Idioma:	Español
Tema:	química/química biológica
Formato:	PDF
Handle:	http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n1165_Widuczynski
PDF:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/tesis/tesis_n1165_Widuczynski.pdf
Registro:	https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/tesis/document/tesis_n1165_Widuczynski
Ubicación:	Dep.001165
Derechos de Acceso:	Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Widuczynski, Isaac. (1963). Efectos del antibiótico cicloheximida sobre el metabolismo de Saccharomyces cerevisiae var. ellipsoideus. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n1165_Widuczynski

Resumen:

La acción de la ciolohezimida sobre células de levadura en reposo estableceque la respiración, estudiada por el Qo2 y el anhídrido carbónicodesprendido por consumo de sustratos de D-glucosa-6-c^14 y acetato-2-C^14,disminuye en un 20% con concentraciones mínimas inhibitorias del antibiótico (l a 2,5 μg/ml) y en una tercera parte con 10,μg/ml. Ambos sustratosson asimilados por la levadura en presencia de cicloheximida, observándose una acumulación de C^14 en la fracción de los metabolitos solubles en metanol-aguacuando se aplica en sus concentraciones minimas inhibitorias;la incorporación de radiactividad en la fracción insoluble se inhibeen un 50%. La distribución de la radiactividad entre los metabolitossolubles en metanol-agua se modifica por efecto del antibiótico: disminuyefuertemente la marcación de trehalosa y en un grado menor glutamina yácido aspártico, aumenta la marcación de ácido glutámico y glicina-serina. El anhidrido carbónico desprendido contiene el doble de cantidad de C^14cuando se oxida acetato-2 C^14 y en la fracción insoluble ocurre lo mismoal oxidarse D-glucosa-6-C^14 , aunque ambos sustratos se emplearon con acvidades especificas equivalentes. La cicloheximida determina tanto en células proliferativas como en reposo una acumulación de P^32 de 3 a 4 veces más en relación a lo que incorporan las células no tratadas, sin que se evidencien modificaciones en lacantidad de fosfato dcsado y en su distribución dentro de las diversasfracciones celulares. La ciolcheximida en sus concentraciones minimas inhibitorias impidecasi totalmente la incorporación de los aminoácidos L-valina-C^14 (G),glicina-1-C^14 y L-ácido glutámico-C^14 (G) en las proteínas de levadura. Los aminoácidcs son asimilados por la levadura y la radiactividad total presenteen los metabolitos solubles en metanol-sgua se altera en escasa medidae incluso llega a acumularse, por lo menos durante la primer hora de incubación,cuando está presente el antibiótico. En células proliferativas cultivadas en presencia de glicina-1-C^14 la cicloheximida modifica la interconversión glicina-serina, aminoácidosque se hallan como metabolitos solubles, determinando el aumento de la radiactividad dentro de la serina. Cuando se cultiva células proliferativas levadura junto con L-ácido glutámico-C^14 (G), elantibiótico también altera la distribución de C^14 dentro de los metabolitos solubles en metanol-agua: disminuye la cantidad de ácido glutámico y prolina marcados y se incrementa la glutamina rotulada. Cultivos de células proliferativas en presencia de glicina-1-C^14 y otros con adenina-8-C^14 señalan inhibición de la síntesis de novo de los ácidos nucleicospor acción de la cicloheximida; en cambio las células en reposo ecumulan radiactividaden dicha fracción cuando se encuentran frente el antibiótico. No se observa modificación de la distribución de la radiactividad enlas bases purínicas de los ácidos nucleicos. La cicloheximida condiciona una mayor cantidad de C^14 en la fracción delos nucleótidos libres de células proliferativas y en reposo que se incubaroncon adenina-8-C^14. Analizada la distribución de la rodiactividad dentro delas bases de los nucleótidos libres se observa que la conversión de adenina aguanina se desplaza hacia el incremento de guanina, efecto que se hace más notorio en las células proliferativas. La fracción obtenida como ácidos nucleicos de las células proliferativasincubadas con L-ácido glutámico-C^14,(G) incorporaron radiactividad debido ala presencia de 2 aminoácidos que se extrajeron junto con los ácidos nucleicos:uno era ácido glutámico y el otro un aminoácido azufrado, probablementecistina, cisteína o ácido cistéico. Se hicieron preparados de S-RNA, ribosomas y enzimas de pH 5,0 para observarel efecto de la cicloheximida sobre la biosintesis de proteínas: no eealtera le activación de aminoácidos; la unión de L-leucina-C^14, (U) con S-RNAse modifica en unA pequeña escala cuando se utilizan concentraciones relativamentemente elevadas del antibiótico; le transferencia de este aminoácido desde S-RNAa los ribosomas se inhibe en un 60%, proporción que no alcanza al casi 100% de inhibición de 1a incorporación de aminoácidos a proteinas que tienelugar en la célula entera de levadura.

Citación:

---------- APA ----------

Widuczynski, Isaac. (1963). Efectos del antibiótico cicloheximida sobre el metabolismo de Saccharomyces cerevisiae var. ellipsoideus. (Tesis Doctoral. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n1165_Widuczynski

---------- CHICAGO ----------

Widuczynski, Isaac. "Efectos del antibiótico cicloheximida sobre el metabolismo de Saccharomyces cerevisiae var. ellipsoideus". Tesis Doctoral, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 1963.https://hdl.handle.net/20.500.12110/tesis_n1165_Widuczynski

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