Registro:
Documento: | Tesis de Grado |
Título: | Estudio de la dinámica y organización del receptor de acetilcolina nicotínico mediante análisis de imágenes de superresolución y técnicas avanzadas de microscopía de fluorescencia |
Autor: | Mosqueira, Alejo |
Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
Lugar de trabajo: | Pontificia Universidad Católica Argentina - CONICET. Instituto de Investigaciones Biomédicas (BIOMED)
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Publicación en la web: | 2022-06-15 |
Fecha de defensa: | 2020-10-13 |
Fecha en portada: | 2020 |
Grado Obtenido: | Grado |
Título Obtenido: | Licenciado en Ciencias Físicas |
Departamento Docente: | Departamento de Física |
Director: | Barrantes, Francisco José |
Director Asistente: | Estrada, Laura Cecilia |
Jurado: | Pietrasanta, Lía Isabel; Martínez, Oscar Eduardo; Disalvo, Aníbal Edgardo |
Idioma: | Español |
Formato: | PDF |
Handle: |
http://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nFIS000103_Mosqueira |
PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/seminario/seminario_nFIS000103_Mosqueira.pdf |
Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/seminario/document/seminario_nFIS000103_Mosqueira |
Ubicación: | Dep.FIS 000103 |
Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Mosqueira, Alejo. (2020). Estudio de la dinámica y organización del receptor de acetilcolina nicotínico mediante análisis de imágenes de superresolución y técnicas avanzadas de microscopía de fluorescencia. (Tesis de Grado. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nFIS000103_Mosqueira |
Resumen:
En los últimos años, la física ha adquirido un papel preponderante en el entendimiento de la biología molecular a través de la aplicación de la mecánica estadística y el desarrollo de nuevas tecnologías (como la microscopía de superresolución o “nanoscopía”). En este trabajo, combinamos imágenes de superresolución de microscopía de reconstrucción óptica estocástica (STORM) con una serie de análisis biofísicos para estudiar la difusión lateral del receptor de acetilcolina nicotínico (nAChR) de tipo muscular adulto en la superficie de células de mamífero CHO-K1/A5. Se observó que el nAChR exhibe una dinámica altamente heterogénea. Una proporción muy importante (∼ 52 ± 22 %) se halló completamente inmóvil. La población móvil, por su parte, exhibió un comportamiento mayoritariamente subdifusivo (exponente de anomalía (β) ∼ 0.85 ± 0.23 y coeficiente de difusión generalizado Kβ ∼ 0.26 ± 0.41 μm² s^–β), junto con moléculas únicas de difusión Browniana y, otras minoritarias, superdifusivas. El ∼ 90 % de los receptores (independientemente de su modalidad difusional) exhibieron un comportamiento de difusión intermitente entre dos estados: caminatas al azar (Browniana) interrumpidas por estancias de ∼ 170-470 ms de duración en zonas de confinamiento con radios de ∼ 36 ± 13 nm y alto contenido de obstáculos. A nivel poblacional, los nAChRs forman parte de eventos de agregación supramolecular de ∼ 3.9 ± 0.8 s de duración y en zonas con radios promedio de 149 ± 13 nm. La modificación del contenido de colesterol de membrana produjo cambios tanto en la dinámica individual como en la poblacional. Por un lado, el enriquecimiento de colesterol disminuyó la proporción de trayectorias subdifusivas y aumentó considerablemente la proporción de trayectorias superdifusivas, generando un aumento en los parámetros dinámicos del receptor ((β) ∼ 0.91 ± 0.23 y (Kβ) ∼0.43 ± 0.79 μm²s^−β). Por otro lado, la reducción del colesterol se vio asociada a una desestabilización de los eventos que lo confinan y que lo agregan, reflejada en una reducción significativa de las duraciones (∼ 250-700 ms y ∼ 2.5 ± 0.1 s, respectivamente) y de los tamaños (∼ 32 ± 13 nm y ∼ 107 ± 4 nm radio, respectivamente) en donde ocurren. Por lo tanto, la combinación entre estancias de confinamiento del orden de milisegundos y eventos de auto agregación del receptor del orden de segundos, ambos dependientes de la concentración de colesterol, determina la dinámica individual y poblacional del receptor en membrana.
Citación:
---------- APA ----------
Mosqueira, Alejo. (2020). Estudio de la dinámica y organización del receptor de acetilcolina nicotínico mediante análisis de imágenes de superresolución y técnicas avanzadas de microscopía de fluorescencia. (Tesis de Grado. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nFIS000103_Mosqueira
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Mosqueira, Alejo. "Estudio de la dinámica y organización del receptor de acetilcolina nicotínico mediante análisis de imágenes de superresolución y técnicas avanzadas de microscopía de fluorescencia". Tesis de Grado, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2020.https://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nFIS000103_Mosqueira
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