Registro:
| Documento: | Tesis de Grado |
| Título: | Evaluación funcional de las proteínas RCC1L y TCF1, en la regulación de procesos circadianos y del desarrollo en Arabidopsis thaliana |
| Título alternativo: | Functional evaluation of RCC1L and TCF1 proteins in the regulation of circadian processes and development in Arabidopsis thaliana |
| Autor: | Grassi, María Eugenia |
| Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
| Lugar de trabajo: | Fundación Instituto Leloir - CONICET. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires (IIBBA)
|
| Publicación en la web: | 2026-07-08 |
| Fecha de defensa: | 2025-05-09 |
| Fecha en portada: | Mayo 2025 |
| Grado Obtenido: | Grado |
| Título Obtenido: | Licenciado en Ciencias Biológicas |
| Departamento Docente: | Departamento de Biodiversidad y Biología Experimental |
| Director: | de Leone, María José |
| Director Asistente: | Yanovsky, Marcelo Javier |
| Jurado: | Segretin, María Eugenia; Murcia, Mauro Germán; Beckwith, Esteban Javier |
| Idioma: | Español |
| Formato: | PDF |
| Handle: |
https://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nBIO001807_Grassi |
| PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/seminario/seminario_nBIO001807_Grassi.pdf |
| Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/seminario/document/seminario_nBIO001807_Grassi |
| Ubicación: | BIO 001807 |
| Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Grassi, María Eugenia. (2025). Evaluación funcional de las proteínas RCC1L y TCF1, en la regulación de procesos circadianos y del desarrollo en Arabidopsis thaliana. (Tesis de Grado. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nBIO001807_Grassi |
Resumen:
El reloj circadiano de plantas es un sistema molecular altamente conservado que regula diversos procesos fisiológicos y del desarrollo, permitiendo adaptarse e incluso anticiparse a los cambios ambientales cíclicos. Su funcionamiento está mediado por redes de regulación génica que integran señales ambientales como la luz y la temperatura con respuestas endógenas que modulan el crecimiento y su metabolismo. A pesar de los avances en la identificación de los componentes centrales del reloj, la caracterización de nuevas interacciones y reguladores sigue siendo clave para comprender su complejidad y su impacto en el desarrollo vegetal. En el presente proyecto de investigación se planteó como hipótesis central que los genes RCC1L (RCC30) y TCF1 (RCC80) de Arabidopsis thaliana podrían estar implicados en la regulación del reloj circadiano de plantas y los procesos del desarrollo controlados por este, posicionandolos como candidatos de interés para su estudio. El objetivo de este trabajo se enfocó en el estudio de mutantes con pérdida de función para estos genes y el estudio de su impacto en la regulación circadiana y los procesos regulados por el reloj. Para ello se generaron líneas editadas en RCC30 y RCC80 mediante la implementación de la tecnología CRISPR/Cas9 y se obtuvieron líneas mutantes estables por inserción de ADN- T. Estas líneas resultaron en diferentes niveles de atenuación para la expresión de estos genes y fueron contrastadas contra plantas salvajes y una línea sobreexpresante para RCC30. A partir de los ensayos fisiológicos se pudo concluir que ni la disminución parcial ni la anulación total de estos genes impacta sobre la regulación de los ritmos cuantificables en ensayos de movimiento de hojas. No obstante, las diferentes líneas mutantes sí evidenciaron diferentes niveles de alteración en la regulación de procesos del desarrollo como la elongación de hipocotilos o la transición a la etapa reproductiva. En especial, aquellas líneas sobreexpresantes o codificantes para versiones proteicas alternativas de los genes RCC. De esta manera, aunque los datos no permitieron confirmar categóricamente su rol como genes asociados a la regulación de la función circadiana, sí evidencian que RCC1L y TCF1 podrían formar parte de procesos controlados o influenciados por el reloj. Así, se cumplieron los objetivos propuestos de caracterización funcional y expresión, aportando conocimientos novedosos sobre estos genes y abriendo nuevas preguntas sobre su regulación e interacción con la red circadiana. En conjunto, este trabajo constituye una primera aproximación al estudio de RCC1L y TCF1 en Arabidopsis thaliana, y sienta las bases para futuras investigaciones orientadas a dilucidar sus funciones moleculares, su potencial interacción con componentes del reloj, y su impacto sobre el desarrollo de la planta en diferentes condiciones ambientales.
Abstract:
The plant circadian clock is a highly conserved molecular system that regulates various physiological and developmental processes, allowing plants to adapt to and even anticipate cyclical environmental changes. Its functioning is mediated by gene regulatory networks that integrate environmental signals such as light and temperature with endogenous responses that modulate growth and metabolism. Despite significant progress in identifying the core components of the clock, the characterization of new interactions and regulators remains essential for understanding its complexity and its impact on plant development. In this research project, the central hypothesis proposed that the Arabidopsis thaliana genes RCC1L (RCC30) and TCF1 (RCC80) may be involved in the regulation of the plant circadian clock and in developmental processes controlled by it, positioning them as genes of interest for further study. The objective of this work focused on the analysis of loss-of-function mutants for these genes and the assessment of their impact on circadian regulation and clock-controlled processes. To this end, edited lines for RCC30 and RCC80 were generated using CRISPR/Cas9 technology, and stable mutant lines were obtained through T-DNA insertion. These lines exhibited varying levels of gene expression attenuation and were compared to wild-type plants and an RCC30 overexpressing line. Physiological assays showed that neither partial knockdown nor complete knockout of these genes affected the regulation of measurable rhythms in leaf movement assays. However, the different mutant lines did display varying degrees of disruption in the regulation of developmental processes such as hypocotyl elongation and the transition to the reproductive stage—particularly those lines that overexpressed or encoded alternative protein versions of RCC genes. Thus, although the data did not conclusively confirm a role for these genes in the regulation of circadian function, they do suggest that RCC1L and TCF1 may be involved in processes that are controlled or influenced by the clock. The proposed objectives regarding functional characterization and expression analysis were fulfilled, providing novel insights into these genes and opening new questions about their regulation and interaction with the circadian network. Altogether, this work represents a first approach to the study of RCC1L and TCF1 in Arabidopsis thaliana, and lays the groundwork for future research aimed at elucidating their molecular functions, potential interactions with clock components, and their impact on plant development under different environmental conditions.
Citación:
---------- APA ----------
Grassi, María Eugenia. (2025). Evaluación funcional de las proteínas RCC1L y TCF1, en la regulación de procesos circadianos y del desarrollo en Arabidopsis thaliana. (Tesis de Grado. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nBIO001807_Grassi
---------- CHICAGO ----------
Grassi, María Eugenia. "Evaluación funcional de las proteínas RCC1L y TCF1, en la regulación de procesos circadianos y del desarrollo en Arabidopsis thaliana". Tesis de Grado, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2025.https://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nBIO001807_Grassi
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