Registro:
| Documento: | Tesis de Grado |
| Disciplina: | biologia |
| Título: | Estudio de la expresión de ciclina A y su interacción con el receptor de progesterona en el modelo experimental de cáncer de mama humano T47D |
| Autor: | Ayre, Marina |
| Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
| Filiación: | Instituto de Biología y Medicina Experimental (IBYME). Laboratorio de Carcinogénesis Hormonal
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| Publicación en la web: | 2018-06-30 |
| Fecha de defensa: | 2017-12-20 |
| Fecha en portada: | 2017-12 |
| Grado Obtenido: | Grado |
| Título Obtenido: | Licenciado en Ciencias Biológicas |
| Director: | Fabris, Victoria Teresa |
| Idioma: | Español |
| Tema: | biología/biología molecular y celular
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| Formato: | PDF |
| Handle: |
http://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nBIO001599_Ayre |
| PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/seminario/seminario_nBIO001599_Ayre.pdf |
| Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/seminario/document/seminario_nBIO001599_Ayre |
| Ubicación: | Dep.BIO 001599 |
| Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Ayre, Marina. (2017). Estudio de la expresión de ciclina A y su interacción con el receptor de progesterona en el modelo experimental de cáncer de mama humano T47D. (Tesis de Grado. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nBIO001599_Ayre |
Resumen:
El cáncer de mama es la neoplasia más frecuente entre las mujeres y específicamente en nuestro país laincidencia de esta enfermedad es del 18% considerando todos los tipos de cáncer. Aproximadamente el 75%de las pacientes con cáncer de mama presentan tumores con receptores hormonales positivos, receptoresde estrógenos (RE) y de progesterona (RP). Estas pacientes reciben como tratamiento una terapia endócrina,basada en la administración de anti-estrógenos. Sin embargo, un alto porcentaje de las mismas pierde larespuesta a la terapia, generándose resistencia al tratamiento. El rol de los progestágenos en cáncer de mama ha sido menos estudiado que el de los estrógenos, sinembargo numerosos datos bibliográficos sostienen que la progesterona cumple un rol en la inducción ymantenimiento del fenotipo neoplásico en la glándula mamaria. El estudio del RP en el modelo murino de carcinomas mamarios inducidos por acetato demedroxiprogesterona (MPA) mostró una asociación entre su perfil de expresión de isoformas y la respuestaal antiprogestágeno mifepristona (MFP). Los tumores sensibles a la terapia presentan una mayor expresiónde la isoforma A del RP (RPA), mientras que los tumores resistentes al antiprogestágeno tienen mayorproporción de isoforma B del RP (RPB). Se demostró también que el RP puede reclutar coactivadores ocorrepresores según el perfil de isoformas en presencia del MPA o de MFP. Por otro lado, los estudios citogenéticos en el modelo murino relacionan la ploidía con la respuestaendocrina. Los tumores con un número de cromosomas diploide mostraron ser respondedores, mientrasque los tumores poliploides pueden ser sensibles o resistentes al tratamiento con antiprogestágenos. Dadoque la alta expresión de ciclina A ha sido asociada con inestabilidad cromosómica y aneuploidía en cáncer demama, se estudió la expresión de esta proteína en el modelo de carcinomas mamarios murinos. El análisis dela expresión de ciclina A por Western blot e inmunohistoquímica en dos familias tumorales del modelomurino mostró niveles de expresión aumentados en los carcinomas mamarios resistentes, sugiriendo que elaumento en la expresión de ciclina A estaría asociado con la resistencia a la terapia endócrina. El objetivo de este trabajo fue evaluar la expresión de ciclina A en el modelo experimental de cáncer demama humano T47D para determinar si se reproduce lo observado en el modelo murino de carcinomasmamarios. De esta manera, teniendo en cuenta la relación entre la respuesta a la terapia endocrina y elperfil de isoformas del RP, se evaluó una asociación entre la expresión de ciclina A y la proporción deisoformas del RP que pueda estar involucrada en la resistencia a la terapia endócrina en el modeloexperimental de cáncer de mama. Para lograr este objetivo se estudió in vitro e in vivo la expresión de ciclina A en la línea celular humana decáncer de mama T47D y las líneas derivadas T47D-YA, que solo expresa RPA, y T47D-YB, que solo expresa RPB. Los estudios in vitro realizados indican que la expresión de ciclina A está aumentada en la línea celular T47DYB. Los ensayos de inmunofluorescencia demostraron que hay una mayor expresión de ciclina A en estalínea respecto de las líneas T47D y T47D-YA (p<0,01; p<0,05 respectivamente) y el análisis por Western Blotsugiere que hay una expresión diferencial de ciclina A en las distintas líneas. Los estudios in vivo demuestran que los tumores generados a partir de la línea T47D-YB presentan uncrecimiento significativamente mayor que las líneas T47D y T47D-YA (p<0,01 y p<0,001 respectivamente). Además mediante ensayos de inmunohistoquímica se determinó que los tumores T47D-YB poseen un índicede proliferación mayor (p<0,001) y exhiben niveles de expresión de ciclina A aumentados (T47D vs T47D-YBp<0,05; T47D-YA vs T47D-YB p<0,001). Sumado a esto, en el Western Blot de extractos proteicos totales delos tumores generados a partir de las distintas líneas, se observa una mayor expresión de ciclina A en lostumores T47D-YB (p<0.01). Se analizó luego la interacción entre ciclina A y las isoformas del RP en el modelo experimental T47D porinmunofluorescencia doble en células en cultivo de las distintas líneas tumorales. La co-localización de ciclina A y RP estimada resultó ser mayor en la línea T47D-YB (T47D vs T47D-YB p< 0,05; T47D-YA vs T47D-YBp<0,001). Teniendo en cuenta los resultados antes descriptos se puede concluir que existe una asociación entre elperfil de isoformas del RP y ciclina A que podría estar cumpliendo un rol en la resistencia a la terapia conantiprogestágenos. Por otra parte se lograron establecer líneas T47D y T47D-YB estables silenciadas para ciclina A. Elsilenciamiento de las líneas generadas se confirmó por Western Blot e inmunofluorescencia, y el efecto de lainhibición de ciclina A se evaluó mediante ensayos de proliferación celular. Las líneas T47D sh-cicA y T47D-YBsh-cicA mostraron un crecimiento significativamente menor que sus respectivas líneas control T47D sh-ctrl y T47D-YB sh-ctrl (p<0,001). Las líneas estables silenciadas para ciclina A generadas en este trabajo son una buena herramienta paracontinuar el estudio de la interacción entre ciclina A y las isoformas del RP, y evaluar su comportamientofrente a la terapia endócrina.
Citación:
---------- APA ----------
Ayre, Marina. (2017). Estudio de la expresión de ciclina A y su interacción con el receptor de progesterona en el modelo experimental de cáncer de mama humano T47D. (Tesis de Grado. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nBIO001599_Ayre
---------- CHICAGO ----------
Ayre, Marina. "Estudio de la expresión de ciclina A y su interacción con el receptor de progesterona en el modelo experimental de cáncer de mama humano T47D". Tesis de Grado, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 2017.https://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nBIO001599_Ayre
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