Registro:
Documento: | Tesis de Grado |
Título: | Estudio de la respuesta humoral en ratas inmunizadas por vía oral con diferentes dosis de Toxina colérica : localización anatómica de las células productoras de anticuerpos específicas |
Autor: | Lev, Paola |
Editor: | Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales |
Publicación en la web: | 2023-04-02 |
Fecha de defensa: | 1997 |
Grado Obtenido: | Grado |
Título Obtenido: | Licenciado en Ciencias Biológicas |
Director: | Fló, Juan |
Idioma: | Español |
Formato: | PDF |
Handle: |
http://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nBIO000504_Lev |
PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/seminario/seminario_nBIO000504_Lev.pdf |
Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/seminario/document/seminario_nBIO000504_Lev |
Ubicación: | Dep.BIO 000504 |
Derechos de Acceso: | Esta obra puede ser leída, grabada y utilizada con fines de estudio, investigación y docencia. Es necesario el reconocimiento de autoría mediante la cita correspondiente. Lev, Paola. (1997). Estudio de la respuesta humoral en ratas inmunizadas por vía oral con diferentes dosis de Toxina colérica : localización anatómica de las células productoras de anticuerpos específicas. (Tesis de Grado. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de http://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nBIO000504_Lev |
Resumen:
En este trabajo nos propusimos determinar la localización anatómica de las células productoras de anticuerpos específicos hacia la toxina colérica administrada por vía oral y definir la importancia de la médula ósea en la producción de anticuerpos específicos a largo plazo. Para llevar a cabo nuestros objetivos se realizaron diferentes esquemas de inmunización en ratas. Luego a los animales inmunizados se les extrajo, en diferentes intervalos, el bazo, el ganglio mesentérico, la médula ósea , las placas de Peyer (PP) y la lámina propia, se prepararon las suspensiones celulares y se analizaron por ELISPOT. De los animales mencionados se tomaron muestras de suero y fluido intestinal que fiieron analizadas por ELISA. Al estudiar la cinética de aparición de las células productoras de anticuerpos (CPA) anti- toxina colérica (TC) en periodos cortos luego de una inmunización oral con una dosis de TC, vimos que el bazo fiie el único órgano donde, 40 hs. después de la inmunización, se establecieron las CPA específicas. En base a este resultado nos propusimos determinar si en el bazo estaba ocurriendo una presentación antigénica, para esto realizamos experimentos en los que se eliminaron las células adherentes de suspensiones celulares obtenidas del bazo o se trato estas suspensiones con un anticuerpo monoclonal anti Ia y se las sometió a un cultivo durante 4 días. Como resultado de estos tratamientos, al finalizar el cultivo observamos una disminución importante en el número de CPA anti TC y el isotipo más afectado fue IgM, esto nos sugiere que podria estar ocurriendo una presentación antigénica en el bazo. Al mismo tiempo suspensiones celulares del ganglio mesentérico (GM) fiieron también sometidas a cultivo, para determinar si 40 hs después de la inmunización oral con TC los blastos activados por el antígeno en las placas de Peyer (PP) migraron al GM pero se encuentran en un estadio temprano de diferenciación o si aún no han comenzado su migración. Al término del cultivo se midió el número de CPA anti TC y observamos un pequeño número de estas células lo cual indica que 40 hs después de la inmunización algunas células migraron desde las PP hacia el GM, pero se encuentran inmaduras en este órgano. Los isotipos más importantes detectados fueron IgG e IgA, pero no IgM, lo cual indica que no ocurre una presentación antigénica en este órgano. Por otro lado, estudiamos la importancia de la médula ósea (MO) en la producción de anticuerpos a largo plazo para lo cual se midió la aparición de CPA anti TC en diferentes órganos a intervalos mensuales y se comprobó que la MO es el único órgano que produce anticuerpos específicos a partir de los tres meses después de la inmunización oral con tres dosis de TC. La producción de anticuerpos anti TC por parte de la MO continuó hasta el final del experimento (8 meses después de la inmunización). Al analizar los resultados en fiinción del número de CPA anti TC por órgano vimos que la MO es el órgano con mayor número de CPA especificas durante todo el periodo estudiado, por lo tanto la MO es el órgano más importante en el aporte de CPA al “pool” total de células que producen una respuesta de anticuerpos especificos. Además vimos que los blastos migran preferencialmente a la MO, ya que este órgano tiene el principal número de CPA y solo el 10% de sus células nucleadas son linfocitos. En la respuesta de memoria temprana inducida por el desafio con TC de animales primados con tres dosis de este antígeno lO meses antes, se vio que también la MO es el órgano con mayor número de CPA anti TC. Para estudiar donde se alojan las células de memoria se realizaron experimentos de transferencia adoptiva donde se pudo comprobar que la TC induce la aparición de células B y T de memoria, ya que cada población celular por separado es capaz de producir una respuesta de anticuerpos anti TC cuando son transferidas a los animales receptores. Si bien tanto la MO como el bazo y el GM son capaces de transferir células de memoria, los dos últimos fiieron los que transfirieron la mayor cantidad de ellas. Por lo tanto la MO no es el órgano más importante donde se alojan las células de memoria, aunque si lo es en la mantención de la producción de anticuerpos a largo plazo.
Citación:
---------- APA ----------
Lev, Paola. (1997). Estudio de la respuesta humoral en ratas inmunizadas por vía oral con diferentes dosis de Toxina colérica : localización anatómica de las células productoras de anticuerpos específicas. (Tesis de Grado. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales.). Recuperado de https://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nBIO000504_Lev
---------- CHICAGO ----------
Lev, Paola. "Estudio de la respuesta humoral en ratas inmunizadas por vía oral con diferentes dosis de Toxina colérica : localización anatómica de las células productoras de anticuerpos específicas". Tesis de Grado, Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, 1997.https://hdl.handle.net/20.500.12110/seminario_nBIO000504_Lev
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