Se modeliza la adhesión de anticuerpos monoclonales (mAb) sobre la membrana eritrocitaria (GR) con el modelo de adsorción de Langmuir, suponiendo que un anticuerpo se liga únicamente a un antígeno. La cantidad de mAb ligados durante cierto tiempo es proporcional a la concentración de mAb en solución, al número de antígenos presentes sobre la célula y a las características del mAb. En consecuencia, la cantidad de mAb ligado es proporcional al número de antígenos, aun antes de que el equilibrio sea alcanzado. Usando este modelo se determinó el número de Glicoforina A (GPA) sobre el GR, analizando las mediciones obtenidas por citofluorometría de flujo en soluciones de GR incubados con muy bajas concentraciones de mAb anti-GPA. El número de GPA por célula es obtenido sin el problema de la aglutinación eritrocitaria, por lo que este método es más preciso que los habituales, ya que la aglutinación durante las mediciones resulta en agrupamientos celulares que son contados como una única célula, dando valores incrementados de fluorescencia, forward y side scattering. El número de sitios GPA obtenido coincide con los de la bibliografia, pudiendo utilizarse esta técnica para cuantificar otros antígenos de GR, siempre y cuando pueda suponerse que la unión es uno a uno
The statistical form of the Langmuir adsorption isotherm was used to modeler the adhesion of monoclonal antibodies (mAb) to the erythrocyte membrane (GR). For this, one antibody is assumed to bind exactly one antigen on the erythrocyte membrane. The amount of antibodies present on the cell after a given time equals to the amount of antibodies bound during this time. Flow cytometric analysis of RBC is usually used to quantify the antigen density. Red blood cells in native state (non fixed) were utilized. Agglutination during measurement may result in clumps of several cells, which are counted as single cells. Then, forward scattering, side scattering and fluorescence will be increased. To avoid the agglutination problem, we measured the fluorescence intensity for the sample incubated at different slow anti-GPA concentrations. The number of GPA sites obtained for samples from health donors were similar to those found in literature. A simple method to quantify GPA sites on erythrocytes was developed. It could be applied to quantify other membrane antigens whenever one antibody is assumed to bind exactly one antigen
| Título: | Uso de un modelo de adsorción simple para la cuantificación de glicoforina "A" sobre la membrana eritrocitaria |
| Autor: | Riquelme, Bibiana Doris; Isla, Natalia G. de; Valverde, Juana Rosa; Rasia, Rodolfo José; Stoltz, Jean Francois |
| Fecha: | 2002 |
| Título revista: | Anales AFA |
| Editor: | Asociación Física Argentina |
| Handle: | http://hdl.handle.net/20.500.12110/afa_v14_n01_p278 |
| Ciudad: | Villa Martelli, Buenos Aires |
| Idioma: | Español |
| Año: | 2002 |
| Volumen: | 14 |
| Número: | 01 |
| Título revista abreviado: | An. (Asoc. Fís. Argent., En línea) |
| ISSN: | 1850-1168 |
| Formato: | |
| PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/afa/afa_v14_n01_p278.pdf |
| Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/afa/document/afa_v14_n01_p278 |
