La glicoforina A (GPA) es la sialoglicoproteína predominante en la superficie de los glóbulos rojos humanos (GR). En estado nativo, la GPA no interactúa significativamente con el citoesqueleto de la membrana del glóbulo rojo aunque se ha observado que la unión de anticuerpos específicos puede producir una alteración en las propiedades mecánicas de la membrana. Para evaluar este efecto se utilizó un Fragilímetro. Este instrumento permite determinar la resistencia osmótica de la membrana de los glóbulos rojos (GR) por medio de la medida de la extinción de un haz láser proyectado a través de una suspensión de GR. Esta suspensión está sujeta, por difusión, a una variación continua de salinidad desde un equilibrio isotónico (154 mM de NaCl) a uno hipotónico (25 mM de NaCl). La variación de la presión osmótica induce sobre los GR una lisis progresiva, la cual conduce a un cambio de la intensidad de la luz transmitida. Las determinaciones se realizaron con muestras de sangre de dadores sanos, incubadas con distintas concentraciones de un anticuerpo monoclonal anti-GPA. La determinación de los valores de hemólisis inicial, 50 % y total permiten la evaluación de la fragilidad de la célula a través de su resistencia osmótica membranal. Nuestros resultados muestran un aumento de la resistencia osmótica a medida que aumenta la cantidad de anticuerpo incorporado durante la incubación. Esto podría deberse a que la unión de los anticuerpos específicos induce un cambio conformacional en el dominio citoplásmico, que resulta en su asociación aumentada con el citoesqueleto de los GR, disminuyendo en consecuencia, la deformabilidad de su membrana
Glycophorin A (GPA) is the predominant sialoglycoprotein on human red blood cells (RBC) surface. In its native state, GPA does not significantly interact with the red cell membrane skeleton but it has been showed that the binding of specific antibodies to GPA can produce an increase in membrane rigidity. To study this effect a Fragilimeter was used. This device allows determining the osmotic resistance of RBC by measuring the extinction of a laser beam projected across a RBC suspension. The suspension is subject, by diffusion, to a variation of salinity from an isotonic equilibrium (154 mM of NaCl) to a hipotonic one (25 mM of NaCl). The variation of osmotic pressure induces a progressive lysis on RBC and a change in the extinction of the transmitted light. Determinations were made with blood samples from healthy donors incubated with different concentrations of monoclonal antibody anti-GPA. Initial, 50% and total hemolysis values allow the evaluation of the cell fragility by its membrane resistance. Our results show an increase in osmotic resistance with the increase of the amount of monoclonal antibody added. It could be produce because the binding of specific antibodies to GPA induces a conformational change in the cytoplasmic domain of the protein that results in its increased association with the membrane skeleton. As a consequence, membrane deformability decreases
| Título: | Análisis de la resistencia osmótica de glóbulos rojos humanos incubados con anticuerpos monoclonales anti-GPA |
| Autor: | Isla, Natalia G. de; Valverde, Juana Rosa; Rasia, Rodolfo José; Stoltz, Jean-Francois; Riquelme, Bibiana Doris |
| Fecha: | 2002 |
| Título revista: | Anales AFA |
| Editor: | Asociación Física Argentina |
| Handle: | http://hdl.handle.net/20.500.12110/afa_v14_n01_p268 |
| Ciudad: | Villa Martelli, Buenos Aires |
| Idioma: | Español |
| Año: | 2002 |
| Volumen: | 14 |
| Número: | 01 |
| Título revista abreviado: | An. (Asoc. Fís. Argent., En línea) |
| ISSN: | 1850-1168 |
| Formato: | |
| PDF: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/download/afa/afa_v14_n01_p268.pdf |
| Registro: | https://bibliotecadigital.exactas.uba.ar/collection/afa/document/afa_v14_n01_p268 |
